压-力作用下面包酵母胞内谷胱甘肽.doc

压-力作用下面包酵母胞内谷胱甘肽!!压力作用下面包酵母胞内谷胱甘肽和麦角固醇的变化*中国生物工程杂志ChinaBiotechnology,2006,26(1):56,59乔长晟刘伯宁徐旭贾士儒**(天津科技大学天津市工业微生物重点实验室天津300222)摘要以高纯空气(O2?N2,21?79)为加压介质,、麦角固醇的含量变化。结果表明:加压培养时两株酵母菌的对数生长期延迟出现,对数生长期的持续时间缩短,而且两株菌的比生长速率均明显低于对照组,同时两株菌的倍增时间也较对照组有所延长;压力刺激可显著提高面包酵母细胞内谷胱甘肽(GSH)的含量,但麦角固醇含量的变化却不明显。%,而加压3h后麦角固醇含量比对照组提高了201,;%,但其麦角固醇含量反而降低。这说明不同的酵母菌对压力刺激的反应是不同的。:20050416修回日期:20051024*国家自然科学基金资助项目(20176041)**通讯作者,电子信箱:******@、紫外线、加热或化学损伤等外在条件刺激下会发生应激反应,产生各种自我保护性物质,如海藻糖、谷胱甘肽等。谷胱甘肽(glutathione,GSH)是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸通过肽键缩合而成的三肽化合物,它可以清除自由基,缓解由于放射线、放射性药物或抗肿瘤药物所引起的白细胞减少等症状,还可以抑制乙醇侵害肝脏产生脂肪肝,1,。另外,有研究表明细胞内谷胱甘肽含量的变化与动物细胞的凋亡之间存在一定的关系,2,,因此,研究酵母细胞内谷胱甘肽的变化将有助于了解微生物细胞的凋亡机制。麦角固醇是真菌细胞膜的重要组成成分,它在确保膜结构的完整性、与膜结合酶的活性、膜的流动性、细胞活力以及物质运输等方面起着重要作用。作为脂溶性维生素D2的前体,麦角固醇经紫外线照射后可转化为维生素D2。同时麦角固醇(ergosterol)是酵母的“生存因子”之一,它能够延长处于衰减阶段的酵母生存时间,而且其生物合成途径中的几个关键环节还是抗真菌药物的作用靶位,3,。本文以压力作为刺激因子作用于酵母细胞,研究面包酵母胞内谷胱甘肽、麦角固醇的变化,有助于深入研究和了解酵母对高压的应激反应机制。(haromycescerevisiae)1447由天津科技大学生化工程研究室保藏。;种子培养基(g/L):葡萄糖20,蛋白胨20,酵母膏10,;发酵培养基(g/L):葡萄糖30,酵母膏5,(NH4)2SO45,KH2PO46,,,,,。:烘干恒重法;酵母生长曲线测定:比浊法;谷胱甘肽的定量分析:参见文献,4,;麦角固醇含量的测定,5,:,放于250ml碘量瓶中,加醇碱溶液(20%NaOH:95%乙醇,5?3,v/v)32ml,在85~90?,加95,乙醇4ml,再!!皂化1h,蒸发去除乙醇后,自然冷却到室温,加50ml乙醚,振荡15m