绿竹和雷竹SOC1同源基因克隆和功能分析.pdf

独创性声明本人声明,所呈交的学位论文,是在指导教师指导下,通过我的努力取得的成果,并且是自己撰写的。尽我所知,除了文中作了标注和致谢中已经作了答谢的地方外,论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成果,也不包含在浙江农林大学或其他教育机构获得学位或证书而使用过的材料。与我一同对本研究做出贡献的同志,都在论文中作了明确的说明并表示了谢意。如被查有严重侵犯他入知识产权的行为,由本人承担应有的责任。学位论文作者亲笔签名:銎缸日期:丝】2:盎2论文使用授权的说明本人完全了解浙江农林大学有关保留、使用学位论文的规定,即学校有权送交论文的复印件,允许论文被查阅和借阅;学校可以公布论文的全部或部分内容,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。保密,在——年后解密可适用本授权书。口不保密,本学位论文属于不保密。西(请在方框内打“√”)学位论文作者亲笔签名:墨盎堡日期:塑区￡皇学位论文作者亲笔签名:塑监鱼日期:2咝《:!指导教师亲笔签名:日期:竺!!:■摘要摘要SOCI(SUPPRESSOROF0vEREⅪPREssIoNOFcou/AGL20(AGAMOS-L1KE20)是MADS—box家族一员,在植物开花过程中起着重要的调控作用,它能够整合来自光周期途径、春化途径、自主开花途径和赤霉素途径中的信号,并与其它基因相互作用共同调节植物的开花时间以及花的类型和花分生组织。竹类植物开花时问具有不确定性,营养周期长,因此SOCl的克隆对竹类植物的成花机理研究具有重要意义。本课题根据水稻、小麦、玉米、高粱以及雷竹反转录组数据库设计引物,采用RACE方法分别得至:IjBoSOClcDNA全长1049bp和PvSOClCDNA全长1025bp。高保真酶扩增绿竹SOCIORF区得到BDSDC』5种片段,分别命名为BoSOCl1-3,BoSOCI1-5,BoSOClO一2,BoSOClO一8,BoSOCl2-5。其中BoSOCl1-3开放阅读框为666bp,编码221个氨基酸;BoSOCI1-5开放阅读框为669bp,编码222个氨基酸:BoSOClQ一2开放阅读框为672bp,编码223个氨基酸;BoSOClQ一8开放阅读框为669bp,编码222个氨基酸;BoSOCl2-5开放阅读框为675bp,编码224个氨基酸。高保真酶扩增雷竹SOCIORFE,得到1条PvSOCl序列,PvSOCl开放阅读框为681bp,编码226个氨基酸。通过序列比对发现BoSOCl和PvSOCl基因在植物中相当保守,并且与禾本科植物可聚为一类。-在花芽中的表达量是营养芽中的12倍,而PvSOCl在开花雷竹地上部位中成熟叶中的表达量最高,在叶芽中的表达量最低;PvSOCl在不开花雷竹地上部位中叶芽中的表达量最高,在茎中的表达量最低。PvSOCl转拟南芥功能验证发现35S::PvSOCl拟南芥莲座叶数量明显少于野生型拟南芥,,具有明显的早花表型。转基因株还表现出花型较小,一片花瓣在开花早期被花萼包裹,不能顺利展开,表现出3片花瓣外翻表型;成熟叶片宽且短,色泽较差。转基因实验表明PvSOCl不仅在拟南芥开花过程中起促进作用,并且可能参与了拟南芥其它生理活动的基因调控。关键词:开花时间,BoSOCl,PvSOCl,AGL20,同源克隆ABSTRACTABSTRACTSOCl(SUPPRESSOROF0VE脚RESSIONOFC01)/AGL20(AGAMOUS-LIKE20),onememberoftheMADS-boxfamily,playsallimportantroleinregulatingthefloweringoftheplant,Callintegratethesignalsinvolvedinphotoperiod,vernalization,gibberellinandautonomouspathways,interactwithmanyothergenestOregulatethefloweringtime,,agroupofperennialevergreenswithunpredictable,long-periodic,gregarious,,Triticumaestivum,Zeam