传染病学实习报告.doc

实习报告学院: 动物医学院课程: 传染病学教学实习班级: 动医 63班学号: 1716320 姓名: 孟刚指导教师: 曹瑞兵职称: 副教授实习时间 2009 年5月 23 日至 2009 年5月 29日实习地点逸夫楼 4017 2010 年6月7日南京农业大学教务处制 1 实习报告 1 实习目的:通过对细菌性和病毒性传染病的模拟发病,以掌握家畜传染病的基本临床过程和实验室诊断的基本策略和方法。 2实习材料 试验动物: 4周龄雏鸡、 9-10 日龄鸡胚。 试剂与器材:氯化钠、氯化钾、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、蛋白胨、酵母提取物、伊红美蓝、麦康凯、革兰氏染色液、香柏油、甲醇、药敏片、生化鉴定管、离心机、镊子、解剖剪、接种环、酒精灯、灭菌小青瓶、培养皿、离心管、玻璃匀浆器、滤器、玻片等。 3实习内容 试验鸡人工感染病毒和细菌: 5月23日上午进行试验鸡人工攻毒,每组两只雏鸡,分别用病毒(1:3稀释鸡胚尿囊液病毒) 进行滴鼻点眼,并用菌液( 1:3 稀释细菌) ~ 口服,做好标记放入饲养箱内饲养,观察鸡只的临床症状等。同时,对将要使用到的器皿清洗和灭菌处理。 配制试剂及病毒分离器皿的洗涤与灭菌处理(5月24日): LB 平板、 LB 液体培养基的配制: 按照下列配方,配制 LB 液体培养基 60-70ml ,然后每个试管分装 3ml ,剩余 LB 液体培养基中加入 %的琼脂, 121 ℃,高压后冷却至 45-50 ℃,倾倒平板。配方: NaCl 10g 蛋白胨 10g 酵母提取物 5g加水至 1000ml 生理盐水配制:浓度为 %,配制 50ml ,高压。 伊红美兰平板配制:按说明书进行配制,配制 40ml ,高压后冷却至 45-50 ℃, 倾倒平板。 麦康凯平板配制:按说明书进行配制,配制 40ml ,高压后冷却至 45-50 ℃,倾倒平板。 PBS 的配制:称取 NaCl 、 KCl 、 Na 2 HPO 4·12H 、 KH 2 PO 4 ,加水至 100ml ,高压,备用。 将配制好的各种试剂装入瓶中,放入高压灭菌锅中,与洗涤干净的病毒分离器共同进行灭菌处理。 1% 鸡红细胞的制备: 鸡翅静脉采血 ,加入 % 枸橼酸钠抗凝剂混匀, 2000rpm 低速离心 10min ,弃去上清,加入灭菌 PBS 重悬红细胞,离心,如此反复用 PBS 洗涤离心 2-3 次,最后按照 1%红细胞的量用 PBS 重悬红细胞,即吸取 红细胞加入 50ml PB S 中制成 1% 鸡红细胞。 2 剖检 病理变化剖检: 5月19 日上午对人工发病鸡进行解剖,观察各个组织脏器的肉眼病变,做好记录。 A、先用水,最好是消毒药水浸湿尸体,以防羽毛粘手,影响操作。然后在大腿与腹壁之间各剪一剪,将大腿向两侧用力压,直至股骨头露出,使尸体平衡仰卧放置, 以利剖检。 B、将腹壁皮肤横剪一缺口,向头侧掀开皮肤,注意肌肉有无出血或坏死。 C、沿腹壁至胸侧两边向前剪断肋骨。然后用力将胸骨掀开,暴露胸腹腔,观察肝脏、心脏、气囊等器官的