实验二淀粉酶活性的测定要点.ppt

2016-12-25 生物化学实验 Please be quiet, Please be quiet, 上课了!! 上课了!! 2016-12-25 生物化学实验淀粉酶活性的测定实验二学时: 3 2016-12-25 生物化学实验 1、学习并掌握植物体内淀粉酶活性测定的原理和方法。 2、掌握α,β-两种淀粉酶的理化特性。一、实验目的: 2016-12-25 生物化学实验二、实验原理酶( enzyme ) 是具有高效性与专一性的生物催化剂( biological catalyst )。绝大多数酶的化学本质是蛋白质。特点: 1、酶具有高效性( high catalytic power ) 2、酶具有专一性( specifity ) 2016-12-25 生物化学实验二、实验原理: 酶活性( emzyme activity ) 指酶催化特定化学反应的能力,其大小可用一定条件下酶促反应速度来表示,酶促反应速度可用单位时间内底物的减少量或产物的增加量来表示。 2016-12-25 生物化学实验二、实验原理: 淀粉是植物生长期间以淀粉粒形式存在于细胞的储存多糖。种子、块茎、块根器官含量丰富。天然淀粉含两种组分:直链和支链淀粉。多数淀粉含直链与支链淀粉的比例(20 %- 25 %):(75 %- 80%)。 NRE RE 直链淀粉直链淀粉的螺旋结构 6个残基 RE NRE ?(1- 6)分支点支链淀粉或糖原分子示意图支链淀粉或糖原分支点的结构β-淀粉酶断裂产生游离麦芽糖 2016-12-25 生物化学实验 RE NRE ?(1- 6)分支点支链淀粉或糖原分子示意图β-淀粉酶断裂产生游离麦芽糖淀粉酶能催化淀粉水解为麦芽糖。 2016-12-25 生物化学实验植物中淀粉酶有两种,各有其不同的理化特性。α-淀粉酶耐热不耐酸, 70℃加热 15min 仍保持活性,pH < 时钝化。β-淀粉酶耐酸不耐热, 70℃加热 15min 则钝化。据此钝化其中之一,即可测出另一种酶的活性。 2016-12-25 生物化学实验本实验采用加热法钝化β- 淀粉酶,测定α- 淀粉酶的活性。具体方法是利用 3,5- 二硝基水杨酸比色法来测定淀粉酶水解生成的麦芽糖的含量,以单位时间淀粉酶分解生成麦芽糖的量来表示淀粉酶活性的大小。