罗氏实时荧光定量pcr仪分解ppt课件.ppt

实时荧光定量PCR仪*.一、实时荧光定量PCR的原理荧光定量PCR通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对结果进行分析,计算待测样品的初始模板量。荧光定量PCR仪荧光定量PCR仪是一种带有激发光源和荧光信号检测系统的PCR仪,通常配有电脑系统及相应的分析软件。*定量PCR技术的产生1992年由Higuchi等人第一次报告:使用EB内插染料法插至双链DNA,D的PCR仪检测样品的荧光强度PCR循环=双链DNA=染料=荧光后来用与双链DNA有更强结合力的SYBRGreenI取代EB*荧光定量实时PCR与普通PCR的比较实时在线监控对样品扩增的整个过程进行实时监控,能够实时地观察到产物的增加,直观地看到反应的对数期降低反应的非特异性使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合,提高了PCR反应的特异性增加定量的精确性全程监控,准确的算法进行定量结果分析更加快捷方便,无需跑胶*罗氏产品介绍以及与同类产品之间的对比*一、*l毛细管加热线圈可容纳32个样品的卡盘将荧光仪定位的分档器发动机将样品置于光学仪上的分档器发动机热室风扇滤器免维护的LED光源光学倍增管**热力学结构特点:1、空气加热2、毛细管反应体系优点:1、升降温速度快(℃-20℃/秒),2、体系均一,不存在边缘现象3、把反应体系缩小到0-20ul,节省试剂成本实现快速PCR*光学结构特点:1、免维护的LED冷光源,寿命长达2万小时以上2、光学倍增管(Rodenstock)3、多达6通道()和3通道()实时检测优点:1、毛细管光学特性将光线散射、衍射降至最低,避免LED功率低的问题2、免维护,带自动检验功能3、轻易实现内标、内对照及多重PCR*