同步荧光法测定大鼠血浆中牛血清白蛋白的研究.pdf

第卷第期影像科学与光化学. .
年月.,
同步荧光法测定大鼠血浆中
牛血清白蛋白的研究
覃光炯。,高云华
.中国科学院理化技术研究所光化学转换与功能材料重点实验室,北京;
.中国科学院研究生院,北京
摘要:以异硫氰酸荧光素标记的牛血清白蛋白为模型药物,采用同步荧光法

样品处理、测试条件等一系列因素对测试结果的影响,建立了一种简单有效的
测定生物体内的微量外源性蛋白质的方法,并与酶联免疫吸附法测定结果进行
了比较,二者的测试结果具有良好的一致性.
关键词:同步荧光法;牛血清白蛋白;血药浓度;酶联免疫吸附法
文章编号:———中图分类号: 文献标识码:
许多蛋白质和多肽类物质在临床上具有药效,
生物学技术的飞速发展,越来越多的蛋白质和多肽类药物已被广泛的研究,有的已进入
临床实验阶段Ⅲ.测定这类药物在给药后的药代动力学参数,特别是血药浓度一时间曲
线,对于判定药物的疗效、确定最优给药剂量、指导临床用药具有重要意义.
蛋白和多肽类药物的药代动力学具有生物半衰期短、血药浓度低等特性,同时生物
体内有大量相似的干扰物质存在,
前常用的分析方法主要为免疫分析法、同位素标记示踪法、生物检定法以及一些
理化分析技术如高效液相色谱、质谱、,如免疫
分析法需要开发相应的抗体,测定时间较长,测定结果在很大程度上受到药物与对应抗
体的反应性的影响;同位素标记法测定需要特定的防护措施;高效液相色谱、质谱测定,
样品前处理步骤复杂,且测试所用仪器均较昂贵.
在药物的前期研究中,大多采用动物实验的方法评价药物的药代动力学,.本论文
收稿日期:——:修回日期:——.通讯联系人:高云华,:...
作者简介:覃光炯一,博士研究生,主要从事药学分析研究,:...
第期覃光炯等:同步荧光法测定大鼠血浆中牛血清白蛋白的研究
拟建立一种快速、
用异硫氰酸标记的牛血清白蛋白为模型药物,通过对样品处理、测试方法等
一系列条件的摸索,建立了一种采用同步荧光法测定的大鼠体内药代动力学
的分析方法,并用酶联免疫吸附法验证了该方法的准确性.
实验部分
. 仪器与试剂
仪器:荧光分光光度计日本公司;酶标仪深圳市蕾杜
电子有限公司;超纯水仪美国公司;高速离心机
上海安亭科学仪器厂.
试剂:异硫氰酸荧光素标记牛血清白蛋白,标记比丌:一.,
一./,北京成文免疫化学研究室;牛血清白蛋白酶联免疫试剂盒无锡
罗益生物技术有限公司;牛血清白蛋白标准品中国药品生物制品检定所;氯化钠、氯
化钾、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠均为分析纯试剂,所有实验所用水均为超纯水.
. 大鼠血液的采集以及血清血浆的制备
雄性大鼠乙醚麻醉之后,:血液
,℃保存,于之内离心,:
血液样品取出后装入肝素钠抗凝的离心管中,并立即离心,
浆样品如不立即使用,于一℃冷冻保存