摘要:以鄂藕杂3号莲藕顶芽或侧芽的茎尖为外植体,接种于不一样激素配比的MS培养基上诱导胚性愈伤组织。结果表明,不一样浓度的激素组合对莲的胚性愈伤组织诱导有不一样的影响,最好培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 5.0 mg/L。 关键词:莲;茎尖;诱导;胚性愈伤组织 中图分类号:Q813.1文件标识码:A文章编号:0439-811414-2991-02 Primary Study on Embryogenic Callus Induced from Shoot Tip of Nelumbo nucifera DIAO Ying1,WU Jin-ping2,ZHAO Ling-ling1,HU Zhong-li1 Abstract: The shoot tips of Nelumbo nucifera “E Ou Za 3” were cultured on medium; and embryogenic callus was induced. The result showed that the induction frequency was affected by the concentration of hormone combinations. The optimal induction medium was MS+ mg/L 6-BA+5 mg/L 2,4-D. Key words: Nelumbo nucifera; shoot tip; inducement; embryogenic callus 莲属睡莲科多年生草本植物,是中国主要的水生蔬菜。现在莲的种植仍多采取含有两节充足成熟藕身的子藕作藕种进行无性繁殖的方法,该繁殖方法需种量大,扩繁较慢且成本高。现在,已经有多家研究机构报道了莲藕组培快繁研究[1-4],不过以上研究均是利用诱导丛生苗的方法进行,增殖系数依然受到一定的限制。鉴于此,特进行了莲胚性愈伤组织诱导试验,为探索快速繁殖藕种的有效方法、降低藕种投入开辟新的路径,同时也为莲的基因工程育种打下基础。 1材料和方法 1.1材料 供试材料采自武汉大学莲藕研究中心基地,取鄂藕杂3号莲藕顶芽或侧芽。 1.2方法 1.2.1愈伤组织诱导用自来水将芽冲洗洁净,然后用体积分数为75%的酒精进行表面消毒1 min,随即用1 g/L的HgCl2溶液灭菌8 min,不时摇动,灭菌完成后用无菌水冲洗外植体3次。然后在无菌条件下剥取茎尖生长点,立刻接种到固体培养基上,接种插入深度为外植体长度的1/3。诱导培养基以MS为基础培养基,分别添加6-苄基氨基嘌呤、2,4-二氯苯氧乙酸钠两种植物生长调整剂,其浓度和配比详见表1。蔗糖浓度30 g/L,结冷胶2.2 g/L,pH值5.8。避光培养。 1.2.2继代培养将诱导出的胚性愈伤组织转入继代培养基,继续培养增殖。继代培养基及培养条件和诱导培养基础相同,只是不再添加活性炭。 1.2.3分化培养将胚性愈伤组织转入分化培养基,诱导分化。分化培养基以MS为基础培养基,分别添加6-BA、6-糠基氨基嘌呤两种植物生长调整剂,其浓度分别为0.2 mg/L和0