- - 1 1 - - 原料液↓预处理(加热、调 pH 、凝聚与絮凝) ↓细胞分离(过滤、离心、沉降) ↓细胞破碎(匀化、研磨、溶胞) ↓细胞碎片分离(离心、过滤、双水相萃取) ↓提取(沉淀、吸附、离子交换、萃取、超滤) ↓精制(色谱、电泳) ↓成品加工(浓缩、结晶、无菌过滤、去热原、干燥) 胞胞外外产产物物生物分离流程- - 2 2 - -第九章色谱 Chapter 9 Chromatography 主讲教师:秦晓蓉电子邮件: jeanqxr@ 电话: 027-5058870 - - 3 3 - -目录?色谱基本概念?凝胶色谱?离子交换色谱?亲和色谱?分配色谱?吸附色谱?平板色谱- - 4 4 - -色谱基本概念—学:色谱分离技术、理论塔板数和分离度概念。理解:色谱的分类。应用:分离度的应用,计算理论塔板数。- - 5 5 - -第一节色谱基本概念?色谱法分类?色谱常用术语?色谱理论- - 7 7 - -色谱分离过程?将试样注入色谱柱头,试样本身会在固定相和流动相之间达到分配平衡。?当流动相流动时,会携带发生分配平衡后而存在于流动相的试样将在流动相和新的固定相上又达到分配平衡。?原来仍在固定相中的试样与新的流动相之间也会形成新的分配平衡。- - 8 8 - -色谱法- - 9 9 - -色谱法色谱法: 又称色层法或层析法,是一种物理化学分析方法,它利用不同溶质(样品) 与固定相和流动相之间的作用力(分配、吸附、离子交换等)的差别,当两相做相对移动时,各溶质在两相间进行多次平衡,使各溶质达到相互分离。- - 10 10 - -固定相、流动相和色谱柱?将填入玻璃管或不锈钢管内静止不动的一相(固体或液体)称为固定相; ?自上而下运动的一相(一般是气体或液体) 称为流动相; ?装有固定相的管子(玻璃管或不锈钢管) 称为色谱柱。
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