高尔基体蛋白73GP73在肝癌患者血清及组织中表达及其意义.pdf

学校代罕,10023
学号,82009038
博士学位论文
高尔基体蛋白73GP73在肝癌患者血清
及组织中的表达及其意义
所院北京协和医学院北京协和医院
姓名孙永家
指导教师黄洁夫,毛一雷
导师小组;栖新亭,杨志英,卢欣
学科专业;普通外科学
研究方向肝癌
完成日期2011年4月
I胁删
,Y19857
实验材料、仪器及试制
实验方法.
实验结果
英文缩略语
编写英文名称中文名称
AcrAerylamide丙然酣脓
AFPfeloprotsin町胎蝎白
BCA【Bicinchoninicacid二唐咬申酸
BisBieacyianide甲叉双万燎酯胶
BSA【Bowineserumalbumin牛血清白蛟白
cDNAComplementaryDNA互补脱氯核楷核着
DALY【QualigyadjstedHifsyear伤残调敬生命年
DNADeogyribomcleicaeid脱氢核概核酿
BBBthidiumbromide溶化Z铐
GAPDHGlyeeraldehydephosplatedehydiogensse硫蜂甘油醛脱氢酶
GCH【Giantcelhepatitis巨细胞疲毒
GPJ3【Golgimembranepmtein73商尔基膜蛎白73
HBy【HepatiisBvins乙型肖病毒
HCC【Hepaloceltlareaeinoma肝细胫肝癖
HCV【HepatiisCvis东型肚火病毒
IFNInterferon干批素
mRNA【MessgeRNA信使RNA
NLNormalliver正箩肝
0DOpticaldemsiy光密度
PAGEPolyacnianidegellectmoptoresi梁丙焊酥肽凑胁电泳
PCLT【Pancarcinomatouslivertissues癌旁肚组织
PCRPolymerasechainreacton椿台酶链反应
qRKTPCRReaLtmequantiotivePCR实时定量棍合酶链反应
RNA【Ribomuelsicacid核糗核酸
RURelatveunit相对单位
sGPJ3SermGP73血清GP73
0SMA【asmoothmtseleactin丨平淘肌肌动蛋白
TNFaTumormecmosisfctor肿瘤坏死因子帼
TBETetratromoethene网溶Z烧
TBSTisbufieredsalne世羟界基氯基町焘缓冲波
TEMEDTeramelhylethylenediamine四甲基乙二脓
TThishydroxymettylaninomethane世羟甲基氮基申烧
WHVWoodchuckhepatiisyinus早獭类肚央病毒
中文摘要
研究腊智
我国是乙型肝灵大国,由乙肝进展所致的肚碌化和肚绍胞肚瘦已给我国医疗资
源帮粉了沉重的负担。所癌及其术后复发的早期识断和治疗是提高存活率、改唯颂
后的重要环节。现有的肚细胞肝瘦GHCC的血清标记物主要为甲胎蛎白AFP,
但其敏感性不甚满意,员报道不一3965%,但平均在50%左右,部分早期肚瘦
患者事实上还是无法得到早期诊断及治疗。新近的蛇白组学研究获得的高尔基体蛇
白73GP73将可能成为更好的识断肚瘦尤其是早期肚痴的血清标志物。由北京
协和医院肚能外科为主完成的大样本、多中心的患者血清GP73CsGP73测定的临
床研究,首次在国内外初步担示了GP73在以乙肝为基础的HCC悟者中的高敏感性
和特异性。
然而,现有的研究多数倩留在GP73作为肚瘦血清标志物的可行性研究方面,
此外,针对GP73在机体吊组织器官中的表达情况,仅有少数关于单纯肖癌组织中
的研究报道,日多局限于克症组化水平。而肝癌组织、对应瘦旁组织及正常肚组织
中GP73在蛎白及mRNA水平上的表达情况及其与临应病理、悦者预后等方面的联
系尚未见报道。GP73在肚癌发生发展中的作用机制及其与肚瘦的因果关系等方面
尚未闹明
目的
本研究旨在观宗GP73蛇白及mRNA水平上在组织中表达情况,同时对比检测
相应恩者血清GP73水平,并分析其与临应病理多项指标的关系,及其与肝癌的生
长、侵袭及复发的潜在相关性,从而进一步闻明GP73在肝癌发生发展中的作用机
制,为提供可能的抑制驮瘦生长的新途往及探索新的治疗靶点打下基础
研究方法
收集36例临床手术切阿的肚瘦组织、瘦旁组织及14例手术切除的血管瘢旁正
常肝胎组织,采用WestemBlot方法和qKTPCR方法检测上述组织中GP73蛎白及
mRNA表达水平。结合临床病案记录,观察GP73表达水平与伯别、年龄、肿瘤大
小、肿痤数目、肿瘤分化程度、血管侵犯、复发状忱和生存时间等临床病理资料间
的关系。
研究结果
与我们前期大样本多中心研究结果相似,肝瘦组患者sGP73显著高于对照组