环境微生物学 -微生物监测环境.pptx

环境微生物学 -微生物监测环境
污染物致突变性的微生物检测
传统动物实验与人群流行病学调查
短期生物学试验
一、鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶试验（Ames试验）
（一）原理
正向突变
野生型his+→→→→→→营养缺陷型his-
回复突变
试验菌株：组氨酸营养缺陷型
哺乳动物微粒体酶：大鼠肝匀浆
（二）试验方法
纸片点试法
平皿渗入法
其他方法
第一节 基因突变试验
二、发光细菌试验
（一）原理
正向突变
发光细菌 →→→ 暗变异株

回复突变
试验菌株：费氏弧菌等暗变异株
回复原理：DNA损伤
（二）试验方法
液体培养法：发光强度>3x对照管；阳性结果≥3（5）
（三）应用与评价
与Ames试验有良好一致性
第一节 基因突变试验
三、其他基因突变试验
（一）营养缺陷型菌株回复突变
（二）细菌的正向突变试验
突变位点更多
（三）粗糙脉胞菌的正向突变试验
白色菌落（野生型）；紫色菌落（突变体）
（四）构巢曲霉的突变试验
菌落形态或营养要求：蛋氨酸和2-巯基黄嘌呤
第一节 基因突变试验
一、SOS显色试验
（一）原理：致突变因素诱导细菌SOS修复系统的反应
（二）方法：
检测溶源性大肠杆菌SOS修复的间接最终表现
检测细菌细胞原发直接的SOS反应
（三）应用与评价
准确性与Ames试验相当，比Ames试验简单、快速
第二节 DNA损伤修复试验
二、聚合酶缺陷型菌株试验
（一）原理：比较具有修复能力的菌株与没有修复能力的变异株
（二）方法：
点试法
（三）应用与评价
间接作用；准确性待提高
第二节 DNA损伤修复试验
三、重组缺陷型菌株试验
（一）原理：微生物DNA修复能力的检测（重组修复）
（二）方法：
点试法
（三）应用与评价
间接作用；准确性待提高
第二节 DNA损伤修复试验
四、溶源性细菌试验（原噬菌体诱导试验）
（一）原理：微生物DNA修复能力的检测（重组修复）
（二）方法：
点试法（诱导原噬菌体，裂解指示菌）
第二节 DNA损伤修复试验
酿酒酵母的自发基因重组
第三节 DNA重组试验