鸦胆子油乳诱导膀胱癌细胞j82凋亡及其机制的初步分析研究.pdf

第四军医大学硕士学位论文 1 缩略语表缩略语英文全称中文全称 BSA Bovine serum albumin 牛血清白蛋白 DMSO Dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜 EB Ethidum bromide 溴化乙啶 FBS Fetal bovine serum 胎牛血清 FCM Flow cytometry 流式细胞仪 BJOE brucea javanica oil emulsion 鸦胆子油静脉注射用乳剂 Caspase cysteinyl as partate-specific 天冬氨酸特异性半胱氨 protease 酸蛋白酶 EB ethidium bromide 溴化乙锭 MTT 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5 3-(4,5- 二甲基噻唑-2)-2,5 -diphenyl-2H- tetrazolium bromide 苯基四氮唑溴盐,噻唑蓝 OD optical density 吸光度 PBS phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液 MMP mitochondrial membrane potential 线粒体跨膜电位第四军医大学硕士学位论文 2 CsA cyclosporin A 环孢素 A PI propidium iodide 碘化丙啶 BCG bacillus calmette-guerin 卡介苗 MMC mitomycin 丝裂霉素 OPT hydroxycamptothecin 羟基喜树碱 PCD programmed cell death 细胞程序性死亡 Ac-DEVD-CHO N-Acetyl-Asp-Glu-Val-Asp-CHO Caspase-3 抑制剂 TUR-Bt transurethral resection of bladder tumor 经尿道膀胱肿瘤切除术第四军医大学硕士学位论文 3 鸦胆子油乳诱导膀胱癌细胞 J82 凋亡及其机制的初步研究硕士研究生吕峰导师王禾教授第四军医大学西京医院泌尿外科,西安 710032 中文摘要膀胱癌是我国泌尿生殖系统中发病率最高的恶性肿瘤,其中大部分是浅表性膀胱癌,目前多采用经尿道膀胱肿瘤切除或膀胱部分切除,术后为预防复发多配合膀胱灌注治疗,目前常用的药物为卡介苗、丝裂霉素 C 、羟基喜树碱等。鸦胆子油乳是我国沈阳药科大学自行研制的中药制剂,自上世纪七十年代末应用临床治疗肿瘤以来,显示了良好的抗癌效果。对于膀胱肿瘤,鸦胆子油乳灌注治疗具有复发率低,副作用小,病人容易耐受等优点。因此研究鸦胆子油乳的作用机制对治疗膀胱癌具有十分重要的意义,本课题观察了不同浓度鸦胆子油乳对体外培养的膀胱癌细胞株 J82 细胞增殖的影响,检测作用过程中的 Caspase-3 活性,初步探讨其可能的作用机制,寻找分子水平依据。实验采用 MTT 法检测不同浓度鸦胆子油乳作用不同时间对 J82 细胞的抑制作用, Hoechst 33342 染色不同浓度鸦胆子油乳作用 J82 细胞不同时间后荧光显微镜观察细胞形态,流式细胞术检测不同浓度鸦胆子油乳作用 J82 细胞后细胞凋亡率,应用 Caspase-3 活性试剂盒检测鸦胆子油乳作用后 J82 细胞 Caspase-3 活性。实验结果:不同浓度鸦胆子油乳作用后, J82 细胞增殖受到抑制,其抑制第四军医大学硕士学位论文 4 作用有浓度及时间依赖性,在 ~ ml/L 浓度下鸦胆子油乳抑制 J82 细胞的增殖,并呈现剂量-效应关系; 鸦胆子油乳 ml/L 作用 24 h 后可见典型的凋亡现象;鸦胆子油乳处理组细胞样本 Caspase-3 活性与凋亡率高于空白对照组及鸦胆子油乳加 Ac-DEVD-CHO 处理组。