茯砖茶降脂功能成分研究.pdf

茯砖茶降脂功能成分研究傅冬和坦刘仲华坦4黄建安,蔡汶莉, (1湖南农业大学教育部茶学重点实验室, 2湖南农业大学园艺园林学院植物资源工程系·长沙·410128) 摘要:将现代分离技术与高通量药物筛选技术相结合,从茯砖茶中分离得到6个单体化合物,红外、紫外、质谱、核磁共振鉴定其结构分别为:没食子酸(GA)、没食子儿茶素(GC)、3一甲氧基-4,5一二羟基苯甲酸(MDBA)、3,4一二羟基苯甲酸(DBA)、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)及表儿茶素没食子酸酯(ECG)。选择FXR、LXR、PPAR8、PPAR’,及 3T3一L1细胞模型研究,结果表明,添加浓度50p,g/mL时没食子酸(GA)和表儿茶素没食子酸酯(ECG)-/-;表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)±。添加浓度为 30斗咖L时没食子儿茶素(Gc)±;3一甲氧基-4,5一二羟基苯甲酸(MDBA)对 ±;各化合物对3T3一L1模型作用不明显。关键词:茯砖茶;茶叶组分;分离;结构鉴定;高通量筛选茯砖茶是湖南益阳主产的黑茶之一,因有“发花”工序而具独特的品质特征,作为边销茶成为牧民日不可少的饮料。近年来,随着人们对茯砖茶功效的了解,它也倍受其他地区广大消费者青睐,销量与日俱增。对茯砖茶功效研究的报道较多【1-3】,但对其活性化合物的分离鉴定还鲜见报道。本文采用现代分离技术从中分离制备几种化合物,通过光谱鉴定法对其进行结构鉴定,并选用与降脂减肥作用相关的细胞模型进行高通量筛选研究,以探讨各化合物的活性,为探讨茯砖茶的降脂减肥机理作些基础研究。 1 材料与方法 :沪西BS一30A分步收集器(中国),中4。5 cm×l, cm×100 em、 cm× am玻璃色谱柱(中国),高效薄层色谱仪(瑞士CAMAG),Shimadzu UV一2550紫外分光光度计(日本), Shimadzu UV一2010高效液相色谱仪(日本),WQF一310FTIR红外光谱仪,Agilent 1100 LC/MSD SL, Waters Kromasil C18色谱柱(美国),Varian UnityINOVA一300核磁共振波谱仪(工作频率6-300MHZ) (德国),冷冻真空干燥箱(中国),旋转蒸发浓缩仪(瑞士B chi),恒温水浴仪(中国)等。试剂:大孔吸附树脂HP一20、80—100目聚酰胺,Sephadex LH一20树脂,95%食用酒精,三氯甲烷, 正丁醇,乙酸乙酯等试剂均为分析纯,市售;茯砖茶由湖南益阳茶厂提供。基金项目:湖南省博士后基,金(2011RS4011)、湖南省教育厅重点项目(10A048)及湖南省重大科技专项(08FJl005) 作者简介:傅冬和(1967一),女,湖南醴陵人,教授,博士,研究方向:植物功能成分研究与开发。女通讯作者:larkin—liu@ :15沸水浸提20分钟,趁热过滤后浓缩,依次用三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇分别萃取8次,回收溶剂并经过溶换制备后分别得到三氯甲烷层、乙酸乙酯层、正丁醇层及水层4 个样品,四个