菌落总数的测定课件.ppt

关于菌落总数的测定
第一页，本课件共有21页
一、菌落总数
食品检样经过处理，在一定条件下（如培养基、培养温度和培养时间等）培养后，所得每g（mL）检样中形成的微生物菌落总数。
第二页，本课件共有21页
二、菌落总数测定的意义
1、判定食品被细菌污染的程度及卫生质量。
2、预测食品存用的期限长短。
3、了解细菌在食品中的繁殖动态。
第三页，本课件共有21页
三、设备和材料
除微生物实验室常规灭菌及培养设备外，其他设备和材料如下：
恒温培养箱：36 ℃±1 ℃，30 ℃±1 ℃。
冰箱：2 ℃～5 ℃。
恒温水浴箱：46 ℃±1 ℃。
天平： g。
均质器。
振荡器。
无菌吸管：1 mL（ mL 刻度）、10 mL（ mL 刻度）或微量移液器及吸头。
无菌锥形瓶：容量250 mL、500 mL。
无菌培养皿：直径90 mm。
pH 计或pH 比色管或精密pH 试纸。
放大镜或/和菌落计数器。
第四页，本课件共有21页
四、平板倾注法测定菌落总数
检验步骤(程序)：
检样→稀释处理→做平板→培养→菌落计数→报告结果
第五页，本课件共有21页
（一）、样品的稀释及做平板
1、固体和半固体样品：称取25 g 样品置盛有225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内，8000 r/min～10000 r/min 均质1 min～2 min，或放入盛有225 mL 稀释液的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打1 min～2 min，制成1:10 的样品匀液。
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2、液体样品：以无菌吸管吸取25 mL 样品置盛有225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成1:10 的样品匀液。
（一）、样品的稀释及做平板
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3、用1 mL 无菌吸管或微量移液器吸取1:10 样品匀液1 mL，沿管壁缓慢注于盛有9 mL 稀释液的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），振摇试管或换用1 支无菌吸管反复吹打使其混合均匀，制成1:100 的样品匀液。
4、上述 操作程序，制备10 倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1 次1 mL 无菌吸管或吸头。
（一）、样品的稀释及做平板
（一）、样品的稀释及做平板
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5、根据对样品污染状况的估计，选择2 个～3 个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），在进行10 倍递增稀释时，吸取1 mL 样品匀液于无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿。同时，分别吸取1 mL 空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。
（一）、样品的稀释及做平板
（一）、样品的稀释及做平板
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6、及时将15 mL～20 mL 冷却至46 ℃的平板计数琼脂培养基（可放置于46 ℃±1 ℃恒温水浴箱中保温）倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。
（一）、样品的稀释及做平板
（一）、样品的稀释及做平板
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