遗传学实验果蝇唾腺染色体.ppt

实验四 果蝇唾腺染色体
一、实验目的
掌握果蝇幼虫唾腺染色体的制片技术。
观察果蝇唾腺染色体的主要形态特征。
二、实验原理
1881年，意大利的细胞学家巴尔比尼（Balbiani)在双翅目昆虫摇蚊幼虫的实验四 果蝇唾腺染色体
一、实验目的
掌握果蝇幼虫唾腺染色体的制片技术。
观察果蝇唾腺染色体的主要形态特征。
二、实验原理
1881年，意大利的细胞学家巴尔比尼（Balbiani)在双翅目昆虫摇蚊幼虫的唾腺细胞间期核中发现了一种巨大的染色体，由于存在于唾腺细胞中，所以又称为唾腺染色体。
1933年，美国学者贝恩特（Painter）等又在果蝇和其它双翅目昆虫的幼虫唾腺细胞间期核中发现了巨大染色体。
这种染色体宽约5μm，长400μm，使其比一般体细胞中的染色体粗1000一2000倍，长100一200倍。因而又称为巨大染色体。
巨大染色体的形成
果蝇三龄幼虫的唾液腺细胞不再分裂，停留在永久间期，染色体螺旋化程度低呈充分伸展状态。在幼虫发育过程中细胞核中的DNA多次复制，但细胞、细胞核不分裂．复制后的染色单体DNA也不分开，大约有1000—4000根染色体丝的拷贝，这种现象叫做核内有丝分裂，这种染色体也称为多线染色体。另外唾液腺细胞中同源染色体互相靠拢在一起呈现一种联会状态，称为体联会。
在这些染色体臂上可以看到染色深浅不同，被称做明带、暗带的横纹，这些横纹的位置，宽窄、数目都具有物种的特异性。不同物种，不同染色体的不同部位形态位置是固定的，因此根据染色体各条臂带纹特征和各条臂端部带纹特征能准确识别各条染色体。
由于在唾液腺细胞中8条染色体之间以着丝粒互相连结在一起，经碱性染料染色后，可以观察到一个染色较深的染色中心。短小的第4染色体和x染色体的着丝粒在端部，所以看上去各自只形成一条线状和点状染色体；第2和第3染色体的着丝粒在中央，它们从染色中心以V字形向外伸出(2L,2R,3L,3R)，在显微镜下短小的第4染色体有时不易观察到，因此可以观察到由染色中心向外辐射出的5条长染色体臂和一条短小的染色体臂。雄果蝇的Y染色体几乎包含在染色中心里，因为是异染色质，看起来染色可能淡些。
在染色体臂上还可看到某些带纹通过染色体的解旋、膨大形成的疏松区、其富含转录出来的RNA，因此不着色，是基因活动的区域。在个体发育的不同阶段．疏松区在染色体上出现的部位不同，据此可以研究基因的表达，而且如果染色体有缺失、重复、倒位、易位等，很容易在唾腺染色体上识别出来。
多线染色体的特征
（1）巨大。
（2）体细胞配对，所以染色体只有半数。
（3）各染色体的着丝粒部分互相靠拢形成染
色中心。
（4）横纹有深浅、疏密的不同，各自对应排
列，这意味着基因的排列。
三、实验材料
果蝇的三龄幼虫

%生理盐水, 改良石碳酸品红或醋酸洋红
双筒解剖镜, 解剖针, 吸水纸，显微镜等
位置：在幼虫体前约1/3处。
形状：形如一对香蕉，上小下大。一边常附着带状的不透明的脂肪。
颜色：半透明如玻璃，略带白色，比周围的组织都透明。
唾液腺
四、实验步骤
1、剥离唾腺
在载玻片上滴一滴生理盐水，取三龄幼虫放在其中。左手用解剖针压住幼虫后端1/3处，右手的解剖针按住头部黑色口器向外拉，将头部从身体拉开，唾腺随之而出。
用吸水纸小心地除去幼虫的其他组织和生理盐水，去除幼虫其它组织部分，并把唾腺周围的白色脂肪剥离干净，只保留唾腺。
2、染色
滴加改良石碳酸品红或醋酸洋红，染色约10 min。
3、盖片和压片
染色完成后，盖上干净的盖片，并覆一层滤纸。将片子放在实验台上，用镊子的钝头轻轻敲振盖片，使唾腺细胞分散开成单细胞状态,并用镊子钝头往一个方向推动,最后用大拇指用力压实片子。
4、镜检观察