遗传学实验果蝇唾腺染色体.ppt

遗传学实验二
果蝇唾腺染色体的制备与观察
一、实验目的
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二、实验原理
双翅类昆虫(摇蚊、果蝇等)幼虫期的唾腺细胞很大，其中的染色体称为唾腺染色体(salivary chromosome)；
这种染色体比普通染色体大得多，宽约5μm，长约400μm，相当于普通染色体的100-150倍，因而又称为巨大染色体；
唾腺染色体经过多次复制而并不分开，大约有1000-4000根染色体丝的拷贝，所以又称多线染色体(polytene chromosome)；
三、实验材料
黑腹果蝇的三龄幼虫　
为了得到更好的染色体标本，需要在20—25℃和营养良好的条件下饲养幼虫。选择行动迟缓、肥大，爬上管壁的三龄幼虫（化蛹之前）做标本最佳。
三龄幼虫照片
四、实验仪器与试剂
１. 器具： 双筒体视解剖镜、显微镜、镊子、解剖针、载玻片、盖玻片、培养皿、吸水纸等。

２. 试剂： 改良苯酚品红溶液、生理盐水、1N盐酸。
五、实验步骤
实验前知识准备：
果蝇三龄幼虫的唾腺位于幼虫的头部附近，可以看看显微照片中的位置
（点击图片观察放大图）
实验开始

把载玻片置于双筒镜下。载玻片上滴加生理盐水1-2滴，取三龄幼虫放在其中，操作者两手各握一枚解剖针，左手的解剖针压住幼虫后端1/3处，固定幼虫。右手的解剖针按住幼虫头部，用力向右拉，把头部从身体拉开，唾腺随之而出，唾腺是一对透明的棒状腺体 。用针剔除脂肪组织。
图示
解离：
在载玻片上除去幼虫其它部分，用吸水纸吸去生理盐水，然后在腺体上加 1-2滴1NHCl溶液，作用5-10 min。
冲洗：
用吸水纸吸去HCl ，滴加蒸馏水于腺体上进行冲洗（两次）。
染色：
吸去蒸馏水，加1-2滴苯酚品红溶液，染色10min。
5. 压片观察：用镊子加盖玻片，压片。镜检。
六、实验结果
，找到好的染色体图像后，放到视野中心，再用高倍镜观察。
2. 黑腹果蝇染色体是2n=2×4=8（图一），但由于体细胞配对，又因短小的第4染色体和X染色体的着丝粒在端部，所以染色体的一端在染色中心上，看上去，各自只形成一条线状和点状染色体。只有第2和第3染色体的着丝粒在中央，它们从染色中心以V字形向外伸出（2L，2R，3L，3R），因此共有6条（图二）。
在显微镜下，短小的第4染色体有时不易观察到，所以最容易识别的是5条（图三）。
雄果蝇的Y染色体几乎包含在染色中心里，因为是异染色质，看起来染色可能深些。有经验的人可以发现雄果蝇的X染色体比雌果蝇X染色体要细些，因为雄性只有一条X染色体。