食品中亚硝酸盐含量的测定.ppt

食品中亚硝酸盐含量的测定一、实验目的?、提取的基本操作技能。?。?。二、实验原理?样品经沉淀分离蛋白质,除去脂肪后,在弱酸的条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸起重氮化反应,生成重氮化合物,再与盐酸萘乙二胺偶合,形成紫红色的的染料,其颜色的深浅与亚硝酸盐的含量成正比,可与标准比较定量。通过分光光度计比色测定,计算出样品中亚硝酸盐的含量。反应如下:2HCl+NaNO2+H2N--SO3H重氮化H3SO--Cl----+NaCl2H+-+---N-ClN--SO3H偶合--N--H3SO--N+HCl盐酸萘乙二胺紫红色三、仪器与试剂?①小型绞肉机②分光光度计?①亚铁氰化钾溶液:称取106g亚铁氰化钾溶于水,并定容至1000ml。②醋酸锌溶液:称取220g醋酸锌,加30ml冰醋酸,溶于水并定容至1000ml。③硼砂饱和溶液:称取5g硼砂溶于100 ml热水中,冷却后备用。④%对氨基苯磺酸溶液:,溶于100 ml 20%的盐酸中,避光保存。⑤%盐酸萘乙二胺溶液:,溶于100 ml水中,避光保存。⑥亚硝酸钠标准溶液:,加水溶解移入500 ml容量瓶中,并稀释至刻度。此溶液每ml相当于200ug亚硝酸钠。⑦亚硝酸钠标准使用溶液:临用前, ml, 置于100 ml容量瓶中,加水稀释至刻度。此溶液每ml相当于10ug亚硝酸钠。四、实验步骤??称取经绞碎并混合均匀的样品20克于100ml烧杯中,加硼砂饱和溶液40ml,搅拌均匀后,以70℃以上的热水100~150ml将样品全部洗入250ml容量瓶中,放入沸水浴中加热15分钟,取出冷却后,边转动容量瓶边加入亚铁氰化钾溶液20ml,摇匀后,再加入醋酸锌溶液20ml,以沉淀蛋白质。然后,加水至刻度,混匀,放置半小时后,弃去上层脂肪,清液用滤纸或脱脂棉过滤,弃去初滤液5~10ml,滤液备用。??吸取上述滤液40ml于50ml容量瓶中,、、、、0