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吞噬细胞功能检测实验报告
实验概要
本文介绍了吞噬细胞吞噬功能检测( AssayofthePhagocyticFunctionof
Phagocyte)实验的基本原理、操作步骤及注意事精品文档
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吞噬细胞功能检测实验报告
实验概要
本文介绍了吞噬细胞吞噬功能检测( AssayofthePhagocyticFunctionof
Phagocyte)实验的基本原理、操作步骤及注意事项等。
实验原理
吞噬细胞具有对异物(细菌、绵羊红细胞、鸡红细胞等)吞噬和消化的功能,在机体非特异性免疫中发挥重要作用。
小鼠腹腔内注射硫代乙醇酸钠,可刺激巨噬细胞的聚集。四日后小鼠腹腔内注入羊红细胞悬液,一小时后解剖收集腹腔吞嗜细胞,染色、镜检可观察对羊红细胞的吞嗜现象。通过计算吞嗜百分比或吞噬指数可测定吞噬细胞的吞嗜功能。
主要试剂
PBS缓冲液
3%硫代乙醇酸钠
1%羊红细胞悬液
瑞氏染液
甲醇
主要设备
解剖器材
注射器
尖吸管
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橡皮吸头
小试管
载玻片
实验材料
ICR小鼠
实验步骤
1. 实验准备:用无菌注射器吸取 3%硫代乙醇酸钠 3ml,注射于小鼠腹腔
内。
四日后,注射1%羊红细胞悬液1ml于小鼠腹腔内。
注射1小时后,将小鼠用颈椎脱臼法处死,解剖暴露腹腔,于腹腔靠上部位,
用镊子轻轻夹起腹膜,将腹膜剪一小口,用尖吸管注入 5ml预温的PBS,同时用手
反复揉搓腹腔约 1—2分钟,以便尽可能多地冲洗出小鼠腹腔的吞噬细胞。
用尖吸管吸取腹腔液,置一洁净试管内。
用尖吸管将腹腔液吹打均匀(尽量避免产生气泡),吸取一滴滴于载玻片上,加
盖玻片镜检。
观察结果,也可以将腹腔液涂片,平放于湿盘内,37℃,孵育30分钟。取出涂片,用预温的PBS冲洗3次,然后用甲醇固定1分钟,
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