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番茄酱中番茄红素和β—胡萝卜素

番茄酱中番茄红素和β—胡萝卜素的
提取分别及分析测定
一、试验目的
1、理解有机溶剂提取番茄红素和β—胡萝卜素的方法及原理 2、驾倒入101ml分液漏斗中，加4ml饱和氯化钠溶液[2]，振荡萃取，静置分层。分出较深色有机相后，使其流经一个在颈部装有疏松棉花且在棉花上铺有6g无水硫酸钠的漏斗，以除去其中的微量水份。再用5ml低极性溶剂洗涤枯燥剂，合并枯燥后所得的溶液于一枯燥的50ml圆底烧瓶中。 水浴蒸馏溶液，蒸出大局部溶剂后，在通风橱内干脆水浴加热圆底烧瓶 [3]，并用洗耳球不断向圆底烧瓶吹气,直到完全蒸干为止备用。 2、层析柱的制备










取一支长15cm左右内径为1-，将其垂直固定于铁架上，底部铺上少量棉花，翻开活塞。称取8g氧化铝当心倾入层析柱中，在氧化铝上铺一层棉花[4]。然后向柱内参加15ml石油醚，让溶剂浸润并流过层析柱，留意柱顶部溶剂不能干枯。待溶剂液面刚好与氧化铝外表相切时，关闭活塞，备用。
3、柱层析分别
向蒸干的粗样品中参加2ml苯使其溶解。用一长颈滴管取样，当心滴入层析柱内，留意产品不能接触柱壁[5]。 翻开活塞，让溶液自然流下，待液面刚好与柱顶氧化铝外表相切时，参加2ml石油醚，用50ml枯燥的锥形瓶[6]接收滴出的溶液。待溶剂液面与氧化铝外表相切时，再参加8ml或更多的石油醚，至滴出


的溶液无色，关闭活塞，收集黄色的β-胡萝卜素溶液(a)；翻开活塞，再往层析柱中先后参加2ml及8ml的氯仿，洗至滴出的溶液无色，用另一50ml枯燥的锥形瓶[6] 接收，关闭活塞，收集溶液红色的番茄红素〔b〕。然后用相应温度的水浴蒸干(a)、(b)，差重法分别称出相应浓缩物的重量Wa、Wb()。 4、苏丹红(Ⅰ)工作曲线










(Ⅰ)于小烧杯中，参加少量溶剂(建议用氯仿)［B］在通风橱内水浴加热搅拌溶解，待溶液冷却至室温后全部转移到101ml的容量瓶中，用溶剂(建议用氯仿)稀释定容至刻度线，可得到50μg/ml的标准液。然后用10ml的移液管分别移取该溶液2ml、4ml、6ml、8ml、10ml于五个25ml的容量瓶中，然后参加溶剂将其稀释定容至刻度，它们浓度分别为4μg/ml、8μg/ml、12μg/ml、16μg / ml、20μg/ml。用该溶剂作参比溶液，在波长为510nm 下分别测其吸光度，以吸光度对浓度作图，可得到吸光度对浓度的标准工作曲线图及关系式。
5、番茄红素及β-胡萝卜素含量的测定［D］ 、番茄红素含量的测定及百分含量的计算
往蒸干〔b〕所得的浓缩物中参加5ml的氯仿溶解，此溶液的浓度为C1；，用定量的氯仿分步稀释该溶液，(Ⅰ)溶液的颜色接近，此时溶液的浓度为C2［7］。在400-600nm区间测定番茄红素最大汲取波长λmax，在此λmax下测其吸光度［C］。将该吸光度值代入标准工作曲线，求出其浓度C2，从而推算出番茄酱中番茄红素的含量。

其中：f是C1稀释到C2倍数；各值的单位：C2：μg/ml;W 番茄酱：g.
、β-胡萝卜素含量的测定及色价的计算［D］










用5ml石油醚作溶剂溶解(a)的浓缩物，取出１ml，再用石油醚稀释3-5倍，使