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有机磷对雄性淡水鱼生殖毒性的研究
报告人：陈玉明
专业：细胞生物学
研究方向：生殖细胞
导师：胡家会
聊城大学2008级硕士研究生开题报告
主要内容
一、选题背景
二、选题的目的和意义
三、研究现状和发展趋势
四、课题主
五、技术路线
1、有机磷对雄性生殖系统形态结构影响
饲养鱼
解剖
取精巢
称重
计算精巢/体重比值
固定
逐级脱水
透明
浸蜡
切片
染色
镜检
脱水
双固定
包埋
染色
切片
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅰ
组织水平
Ⅱ
细胞水平
Ⅲ
亚细胞水平
说明：
五、技术路线
2、有机磷对精子运动的影响[2-4]
取精液
制精子悬液
药物处理
饲养鱼
显微观察
运动率
运动时间
运动速度
显微观察
五、技术路线
3、有机磷对淡水鱼精子的氧化损伤
离心
饲养鱼
取精液
药物处理
细胞破裂
离心
用分光光度计测定
超氧化物歧化酶(S0D)
硫代巴比妥酸值（TBARS）
五、技术路线
4、染色体核型分析[5]
饲养鱼
PHA处理
秋水仙碱处理
解剖
取肾脏和精巢
制细胞悬液
离心
水洗
离心
低渗处理
离心
固定
滴片
染色
观察
六、可行性分析
1、生命科学学院有石蜡切片机、正置荧光显微镜（CASA）、倒置荧光显微镜（CASA）、分光光度计、离心机等设备，完全能满足实验的需要
2、电镜观察在青岛大学医学院完成
3、本试验有一定的研究基础和较成熟的实验技术
4、有相关研究文献可供参考
5、指导教师和同学们帮助，一定能完成。
七、创新点
1、生物实验的新材料
玫瑰无须鲃是近几年才使用的一种生物学研究的新材料，国内外研究较少，由于它的优点被广泛应用于生殖、发育及毒理学等方面。
以泥鳅作为实验材料在生物学领域更是少见，但是它的营养价值和经济价值，以及其特有的生物学特性正越来越受到人们的重视。
有机磷农药种类很多，多达160余种，而当前的研究却不是很多。
2、玫瑰无须鲃染色体核型分析还未见到有人研究
3、精子生物学在毒理学方面的应用时间不长
4、农药联合毒性的研究较少
八、预期研究成果
筛选2-3种有机磷农药影响玫瑰无须鲃鱼和泥鳅精子活力的最低浓度，
并测定精巢/体重比的变化情况，从显微、亚显微水平揭示有机磷农药对鱼精子的毒性作用
探索玫瑰鱼染色体核型分析方法，进一步揭示玫瑰鱼的遗传信息。
从生化角度研究环境有机磷对精子细胞的氧化损伤，并对有机磷生殖毒性的作用机制进行探讨。
发表研究性论文2-3篇。
九、学位论文工作计划安排
序号
工作阶段名称及内容
起止日期
1
查阅文献：实验前参考、试验中改进、试验后论文写作
-
2
有机磷对淡水鱼精子运动的影响
-
3
玫瑰无须鲃染色体核型分析
-
4
有机磷对淡水鱼雄性生殖系统氧化损伤的研究
-
5
有机磷对淡水鱼雄性生殖系统形态结构的影响
-
6
前期未按时完成的工作
-
7
数据分析、学术论文写作
-
8
学位论文的写作
-
参考文献
[1] Bingsheng Zhoua,b, Wenhua Liu et al. Exposure of spermatozoa to duroquinone may impair reproduction of the common carp (Cyprinus carpio) through oxidative stress, Aquatic Toxicology 77 (2006) 136-142
[2]胡家会,张士崔,,15:104-107
[3] Mokhtar I. Yousef , Kamel I. Kamel et al. An in vitro study on reproductive toxicity of aluminium chloride on rabbit sperm: The
protective role of some antioxidants. Toxicology 239 (2007) 213–223
[4]Mokhtar , Kamel I. Kamel et al. An in vitro study on reproductive toxicity of