淋球菌检查.ppt

淋球菌检查华中科技大学附属协和医院皮肤科林能兴【适应证】淋病【禁忌证】无【并发症】无【用物准备】无菌生理盐水、细小棉拭子、扩阴器、载玻片,培养皿,氧化酶试剂等【操作流程】 1. 分泌物的涂片检查(男性) 1)用灭菌生理盐水洗净尿道口。 2)戴无菌手套,用手指由阴茎根部向尿道口方向挤出脓液,用棉签拭子蘸取脓液,涂于载玻片上,自然干燥后加热固定。 3)革兰氏染色 4)显微镜下观察,在多形核白细胞内发现革兰氏阴性双球菌可明确诊断。附:革兰氏染色法革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤,具体操作方法是: (口诀 1 1 半半) 1)载玻片固定。在无菌操作条件下,用接种环挑取少量细菌于干净的载玻片上涂布均匀,在火焰上加热以杀死菌种并使其粘附固定。 2)草酸铵结晶紫染 1分钟。 3)自来水冲洗,去掉浮色。 4) 用碘-碘化钾溶液媒染 1分钟,倾去多余溶液。 5)用中性脱色剂如乙醇( 95% )或丙酮酸脱色 30 秒,革兰氏阳性菌不被褪色而呈紫色,革兰氏阴性菌被褪色而呈无色。 6)用蕃红染液复染 30 秒,革兰氏阳性菌仍呈紫色,革兰氏阴性菌则呈现红色。革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌即被区别开。 1)取材(1)男性患者从尿道取材,用细小棉拭子伸入尿道 2~4cm ,轻轻转动并停留 10~20s 后取出。(2)女性患者在妇检床上取材,先用扩阴器暴露宫颈口,用无菌棉拭子拭去宫颈口表面的分泌物,另取一拭子插入宫颈口内 1~2 cm ,转动并停留 10~20s 后取出。(3)对无性交史女性可采集阴道处分泌物。(4)直肠取材时,应将棉拭子插入肛门 2~3cm 。(5)检查淋球菌咽炎时,应从扁桃体及扁桃体窝取材 2)标本取出后立即接种于培养基中,目前常用加入多粘菌素的血液琼脂或巧克力培养基 3)初次分离培养应使用 5%~10%CO2 浊缸, 培养温度 36 ℃为宜, 24~48 小时后观察