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番茄中八氢番茄红素提取分离工艺研究
崔燕红 王国军 杨科 颜欢 田荣
番茄中含有丰富的类胡萝卜素色素成分，番茄具有重要的营养和药理作用，在食品、医药等方面显示出巨大的应用价值和开发前景。目前番茄中八氢番茄红素提取分离工艺研究
崔燕红 王国军 杨科 颜欢 田荣
番茄中含有丰富的类胡萝卜素色素成分，番茄具有重要的营养和药理作用，在食品、医药等方面显示出巨大的应用价值和开发前景。目前对番茄中有效成分的研究，主要集中在番茄红素。番茄红素的稳定性比较差，八氢番茄红素在番茄中的含量仅次于番茄红素和β-胡萝卜素，从结构上看，他是番茄红素部分氢化后的产物，由于结构中共轭双键数减少，其稳定性将好于番茄红素。随着近年对八氢番茄红素的研究日益增多，发现八氢番茄红素具有和番茄红素类似的抗氧化作用，国际市场上对于八氢番茄红素的需求量也在日渐增大。而国内对于八氢番茄红素的研究很少。本课题已经完成的研究内容包括八氢番茄红素的薄层制备色谱分离，正交设计法优化八氢番茄红素的提取工艺，HPLC条件的摸索。
第一节 八氢番茄红素薄层制备色谱分离
为了获得八氢番茄红素的对照品，我们首先对八氢番茄红素的色谱条件进行了摸索，以硅胶作为吸附剂，不同的溶剂系统作为流动相，在薄层板上摸索色谱条件，然后在制备薄层板上进行分离。
（一）实验材料
1．番茄样品前处理
取番茄酱5kg，以乙酸乙酯浸泡提取，每次6小时，提取的乙酸乙酯用旋转蒸发仪浓缩至浸膏，得提取物50g。
2．薄层板的铺制
称取3--4克的CMC加入1000亳升水中煮沸1小时，然后放置冷却，静置使其中该沉淀的沉淀下来，然后，取适量硅胶加CMC水溶液的上清液，用研钵研排出气泡大约30分钟，调成所需稠度，最后铺板。晾干，在105度的烘箱中烘半小时，活化，备用。
3．色谱条件的摸索
选择条件石油醚，石油醚：乙酸乙酯40:1，石油醚：乙酸乙酯30:1，石油醚：乙酸乙酯20:1，石油醚：环己烷15:1，石油醚：环己烷10:1，等6个色谱条件，在相同条件下点样，展开，观察各硅胶薄层的效果。
（二） 结果与讨论
1．实验结果
各薄层板在日光下可见明显的深红色斑点，为番茄红素，由于八氢番茄红素的极性比番茄红素下，因此其斑点应该在番茄红素的上方，Rf值偏大的地方。仅在石油醚：环己烷15:1和石油醚：环己烷10:1以及石油醚：乙酸乙酯40:1的色谱条件下可观察到明显斑点。因此选择石油醚：环己烷15:1的条件进行制备。
薄层制备采用制备薄层板，点样量约为50mg，展开后挥干溶剂，然后将主要色带刮下，用丙酮洗脱后，挥干丙酮，得到各个色带成分。用紫外测试其紫外光谱，并与相应的紫外图谱对照，准确找到了番茄红素和八氢番茄红素。其中八氢番茄红素的结构经过质谱进行了进一步的确认。通过HPLC进一步确认了其纯度为88%，其纯度有待进一步提高。在质谱图中可看到明显的准分子离子峰545[M+1]，和-28的峰，也就是掉CH2=CH2基团。薄层制备色谱的结果如下：
番茄红素
八氢番茄红素
第二节 八氢番茄红素提取工艺的优化
（一）实验材料与方法