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两性解离
胶体性质
沉淀作用
颜色反应
两性解离
蛋白质中的可解离基团
(1)N-NH3+
(2)C-COOH
(3)Lys-NH3+
(4)Arg-NHC(+NH2)NH2胍基
(5)His-咪唑基
(6)Asp-COOH
(7)Glu-COOH
(8)Tyr-C6H5OH酚羟基
(9)Cys-SH
NH
+NH
解离式与等电点
+
+-
-
pH<pI
pH>pI
pH=pI
蛋白质等电点的特点
(1)蛋白质的等电点是指静电荷为零时环境的pH值。
(2)每种蛋白质都有其特定的等电点。
~
~
~
(3)蛋白质的等电点既与其所含有的氨基酸的种类与数目有关,也与测定时所用溶液的种类和离子强度有关。
(4)蛋白质在等电点时其缓冲能力、溶解度、导电性黏度、膨胀性等都最小。
蛋白质的胶体性质
(1)胶体稳定的条件
质点大小10~1000唉
质点带有相同的电荷
具有溶剂化层
(2)蛋白质成为胶体的因素
蛋白质的分子量1万~100万
PH≠PI时,带有某种静电荷
能形成水化层
蛋白质的胶体性质
(3)蛋白质胶体的性质
不能透过半透膜
溶胶凝胶(湿)凝胶(干)
蛋白质的沉淀作用
沉淀作用
蛋白质沉淀作用的实质就是破坏了蛋白质胶体稳定所需的基本条件:
水化层或带电性
蛋白质沉淀的方法
(1)等电点沉淀法
(酸/碱)
(2)有机溶剂沉淀法
(乙醇、丙酮、尿素、盐酸胍)
(3)盐析法
(硫酸铵、氯化钠)
盐溶
盐析
蛋白质沉淀的方法
(4)重金属盐沉淀
(Hg++,Cu++,Zn++,Fe+++,etal)
(5)生物碱试剂沉淀
(单宁酸、苦味酸、钼酸、三氯乙酸等)
(6)免疫沉淀(抗原+抗体)
(7)SDS沉淀
(8)加热沉淀、离心沉淀等
蛋白质的水解作用
水解过程:
蛋白质蛋白胨短肽氨基酸
方法:酸、碱、蛋白酶
蛋白质水解程度的测定方法
甲醛滴定法
双缩脲反应法
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