VE含量测定.ppt

维生素E含量测定
应该采用何种方法?
根据化学性质:
. ——铈量法
——生成的亚铁离子作用形成有色结合物间接测定(三氯化铁—2,2’—联吡啶比色法)
(一)铈量法
1、原理:
VE用硫酸加热回流,水解成生育酚,用硫酸铈定量地氧化为对一生育醌,过量的硫酸铈氧化二苯胺指示剂而指示滴定终点。
终点:亮黄→灰紫;空白试验.
2、反应条件
(1)VE在H2SO4酸性条件下水解为宜。
碱性溶液中游离生育酚易被氧化。Ce(SO4)2液滴定在酸性溶液中进行,如在碱性中会生成碱式盐而影响测定。
(2)Ce(SO4)2溶于酸水溶液,不溶于醇,α-生育酚溶于酸而不溶于水,
滴定过程中应有一定浓度的乙醇。
(3)本法适用于纯度高的VE供试品。
[检查方法]
,加无水乙醇5ml溶解后,加二苯胺试液1滴,用硫酸铈滴定液()滴定,根据消耗硫酸铈滴定液的量来进行计算
紫外分光光度法
[原理]: 维生素E在碱性溶液中加热水解生成游离生育酚,并被三氯化铁氧化为对生育醌,同时生成亚铁离子。后者与联吡啶生成血红色的配离子,再进行比色测定。
但由于操作麻烦,专属性不高,又容易有干扰,现已被GC取代。
生育酚
[O]
对-生育醌
含量测定
根据物理化学性质:
:
——不适用

方法简便快速,专属性
强。
特别适用于多种维生素
制剂中维生素E的测定。
3、荧光分光光度法
★气相色谱法(ChP)
六十年代起开始研究维生素E的气相色谱法。
GC特点
选择性好灵敏度高速度快分离效能好
气相色谱法(GLC)测定维生素E的优点

可分离维生素E、其异构体及杂质,可选择性地测定维生素E 。适宜测定纯度不高的维生素E及维生素E制剂。
中国药典测定维生素E及维生素E制剂均采用气相色谱法。
(二)气相色谱法
1、色谱条件及系统适应性试验
色谱柱:2m×,
内装硅藻土(80-100目)或高分子多孔小球
固定相:硅酮(OV-17) 涂布浓度 2%的填充柱
固定液→100%二甲基聚硅氧烷毛细管柱
载气:N2,
流速:含2%固定相:以18-20分钟为宜;含5%固定相:以30- 32分钟为宜
柱温:265℃
内标:正三十二烷
检测器:FID(氢火焰离子化检测器)
4、溶液配制:
内标溶液:正三十二烷的环己烷溶液()
对照溶液:对照品溶解于内标溶液中(1mg/ml)
供试品溶液:供试品约50mg,用内标溶液,溶解并稀释至50ml
3、供试品测定
f ×Ax ×Ms
As
Ax:供试品峰面积 F:校正因子
As:内标物的峰面积
2、系统适用性试验:
n ≥ 500(按维生素E计算)
R≥2 (维生素E与内标物
正三十二烷的分离度)
mg=
内标法
供试液(样品+内标)
内标物
对照液(对照+内标)
是样品中不存在的物质
与被测组分峰靠近
能与各组分完全分离
与被测组分的量接近
★定量法: 内标法加校正因子
1
K
A
A
=
内
对
2
K
A
A
=
内
样
实际工作中的计算方法
本品含C31H52O3应为
~ %