三网织红细胞计数.pptx

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网织红细胞(Ret)
是晚幼红细胞脱核后到成熟红细胞间的过渡细胞,是尚未完全成熟的红细胞,其胞浆内残存有嗜碱性的RNA物质。嗜碱性物质与染料凝聚成蓝色颗粒,颗粒与颗粒连缀成线,线连接成网,故而得名。
分型:丝球型、网型、破网型、点粒型。(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型)
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网织红细胞
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计数方法
1、普通光学显微镜法:活体染色后推片镜检
2、网织细胞计数仪法:荧光染色后用流式细胞术计数
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二、试剂器材
1、试剂10g/L煌焦油蓝酒精(水)溶液
2、器材毛细血管采血用具、小试管、载玻片、推片、显微镜、香柏油、二甲苯及擦镜纸、Miller窥盘或直径约20mm(较目镜内径稍小)的圆形硬纸片(正中央开一边长为3mm的菱形或正方形小孔,置目镜光阑处,用于缩视野法计数)
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三、操作步骤
:于载玻片的一端加煌焦油蓝酒精溶液1滴,任其自然凉干后备用,取末梢血或抗凝血一滴,于已干燥的染料上,用推片角混匀后,将两玻片盖合(玻片法);试管法取染液2滴入试管,加血2滴混匀,封闭好,待15分钟以上时间,
:取混合液1小滴于载玻片的一端,推制成薄而均匀的血膜,
,选取红细胞分布均匀网织红细胞染色较好的部分(体尾交界处),滴香柏油转换至油镜,在Miller窥盘下计数小方格中的RBC数和大方格中的网织红细胞数(或数出整个视野中的RBC总数和其中的网织红细胞数,换一视野同法计数至几个视野RBC总数>1000为止)。
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Miller窥盘
A
3
1
B
将Miller窥盘放在显微镜目镜中,通过窥盘中大小方格间的9比1比例关系计算RBC数和Ret数。
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四、计算
:网织红细胞(Retic)百分率(%)=(大方格内Retic总数)/(小方格内RBC总数×9)×100%
:网织红细胞(Retic)百分率(%)=多个视野内Retic总数/多个视野内RBC总数×100%
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五、注意事项
,应待玻璃片上的酒精挥发干燥后,才能加血液,染色时应用推片角不停搅动,使染料和血液混合,防止凝固。
,混合后不能立即推片,室温低时染色时间应适当延长,应覆以另一玻片防止蒸发。
:1为宜,贫血适当加血量。
,弓形移动,多个区域计数
,以免变质沉淀。

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