卤虫孢囊的处理方法.docx

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专利名称::卤虫孢囊的处理方法卣虫孢嚢的处理方法本发明涉及一种处理孢囊(cysts),特别是卤虫孢嚢(Artemiacysts)的方法,在液体^f诚养基中孵育所述孢嚢来生产活食用生物,特别是卣虫无节幼体(Artemianauplii)。生产作为鱼和甲壳类幼虫(crustaceanlarvae)的活食的卣虫无节幼体#皮认为是海洋粉匕场的J^作业。面虫无节幼体的生产步常包括粉匕、分离、富集、冲洗和,其中收获和冲洗卤虫无节幼体逸常需要筛子或浓缩器/冲洗器。棘器事实上是一种&虑器,其用^UUb节幼体中分离废水,从而在l^f匕到适絲酉試^存的最^^Pv^就节幼体中除去多余的水,并JL^富絲洗去无节幼体上的油状包衣。在孵化后,需务降卣虫无节幼体与^J科匕的孢嚢和空孢嚢壳分离,因为这些孢嚢和壳在幼虫槽中会引起大问题。事实上,当它们被食肉动物摄^,它们不肯W皮消化,并且可能会阻道,使#1子鱼或^^肉动物可能死亡。在大多粉^f匕场中,通过将充气管^m^ff中取出来实现分离,这使得^f^f中的不同物体(卣虫无节幼体、完整的孢嚢和空孢嚢壳)得到分离。卣虫无节幼体在^f^ft内自由游动,其可通过^^I光(卣虫无节幼^^ib原吸引)在^f匕锥顶端的底部收集。另一方面,空孢嚢壳易于漂浮,而完整的未醉化卣虫孢嚢易于下沉。后面的这些物体可能会在Jlt^f匕无节幼体后干扰卣虫无节幼体的质量。当在孵化的卣虫无节幼体中发现大量孢嚢
(完整的或空的)时,需要额外的分离步骤来除去卤虫无节幼体中的这些孢嚢。通常^^I筛子,絲过收集筛上的孢嚢来除去卤虫无节幼体中的孢嚢。选择歸子的方式是使无节幼体可以通过筛子,而比如孢嚢的物#恭在筛上。总体上,筛子的筛目尺寸为大约212Hm。接着,将无节幼体自身收集在更细的筛子上。通常4M双筛'Wdoublesievemethod),第一次篩出残留未醉化的孢嚢,第^L过筛出无节幼体。这种基于双篩法的分离过程是细致而费时的过程。才^^#顶部浓缩的卣虫中孢嚢/卣虫无节幼体的比例,该过滤步骤可能有效,也可能无效。存在的孢絲多,滤网堵塞^f^快。堵塞不仅会减小i:腿,而且会增加伤害无节幼体的危险,因jty皮认为;Ulff匕/分离it^呈的一个主要问题。为了防止堵塞,必须有效除去^±>虑过程中滤网上的颗粒。在实施中,水喷射IW无节幼体喷射通it^虑器。事实上,i^虑步骤应该相当快^ii行,因为通常^f亭jtJ^粉贈充气,使得空孢嚢壳在粉^t中上升,而无节幼絲底部浓集。为了避免因氧^1^致的死亡,无节幼体不能在圆锥容器的尖端4亭留太长时间。在孵化场中,用于UM^寻不分离^J^^抱嚢与无节幼体问题的一个方法是对卣虫孢嚢进行(decapsulate)。孢嚢的(-从卣虫胚胎去除孢嚢壳的夕卜层)是一种70^R开发的已知化学方法。标准舰过程包括用NaOCl(次氯酸钠)溶,嚢壳(卵壳),并M限时期内加入
NaOH(用于##高pH)。通itlL^^夕卜面的孢紐。一^Si文热A^终止,需要立即用Na2S203中和脱壳的孢嚢,以防jh^胎氧化。^it当iikitkai^亍皿it^呈,胚胎的生存能力不M到影响,它们可以^^f匕成无节幼M^M^W絲。孢嚢的消除了对分离空孢嚢壳和未^f匕孢嚢的需要。然而,未孵化的脱膜孢嚢会在鱼或虾幼虫槽中迅速下沉,并且会分解和使培养基^f,可能引起细菌感染和疾病。尽管大多IW匕场^^]这种方法,^1种^法的最大缺点狄水可能含有非常高水平的有毒产物,并因此非常难以纯化,例如废水可能含有高水平的COD、C1和A0X。目前,由于处Sii类化学物质的床竟问题增多,大^Lt莫进行该方法是不可能的。另"H^:点AMM过程需要非常大的劳动,而且需M确否则孢嚢的生存能力可能会受到影响。由于A^放热反应,必须^HP脱膜介质,并且应当在准确的时间停止过程,以i^J^胎自身的氧化(参见例如2000年10月,,,"j"郎/aProductionforMarineLarvalFishCulture")。因此,本发明的目的是提^-种能够从自由游动的活食用生物,特别是从卤虫无节幼体中有效分离^J4^抱嚢,以及佑&的空孢嚢壳的新方法,其具有较低的损害或杀死自由游动的活食用生物的危险。为此目的,才娥本发明的方法的特征在于其包括将磁寸顿粒应用到孢ILL的步骤,使##别#所述的液体^[膽养基中能够>^及引所述孢嚢。借助于孢ILh^v^兹性颗粒,而由孢嚢
^f匕出的自由游动的活食用生物上没有磁顿粒,孢嚢可被^^及引并因此可与活食用生物有效分离,而不会损害这些生物。例如可以在^f说养基中^^)^^UNL引^f匕的孢嚢和空孢嚢壳,以从J^f煤养基中除去这些物质,其既可通iiA^f匕槽中移除其上附着了孢囊和孢嚢壳的》翁失来实现,也可通itMJ^f匕槽中移除含自由游动的活食用生物的^f说养基,同时将^^失保留,内来实现。在后一种',中,^^失还可以应用于槽的内部或壁上,使得^J刷t的孢囊和空孢囊壳附着到槽壁上。可^f她或另外地,在^f匕步聯还可将^f说养基引;舰过分离器装置,特别是;胁通it^置,其中含有保留了,^嚢和^|可空孢嚢壳的磁铁。术语磁f顿粒是指能够被》辦失吸引的颗粒。因此,颗粒可由铁磁性的、亚4失》兹性的或甚至是(强)顺磁性的材料制得。由铁磁^il亚铁磁I^^料制得的颗粒可以被磁化,即转变成小不辦失。假使那样,尽管仍然^^i^fM^4^NL引孢嚢或孢嚢壳,该^1失可以用非磁化的磁##料代替。在才M^本发明的方法的-HM^实施方案中,磁I"生颗粒以液体悬浮液的形式、特别是以水性悬浮液的形式应用于孢囊上,优选当孢嚢具有干表面时,以使它们是自由流动的。在另一个实施方式中,磁性颗粒以粉末的形式应用于孢ILh。术语"自由流动"是指^^说明书中孢嚢不^^^在^^形成小块,而是单^#在,它们可容易^v—粉氏上倾倒(pour)。已^^现,即^i^兹性颗粒上没有^f可^^'J或粘性包衣时,磁)"生颗粒也能充分附着到孢
lLh,并雖粉膽养基中##附着在其上,使得在^f^孢囊和空孢嚢壳可通itf兹性吸引从自由游动的活食用生物中分离。不'义—^I津給剂的一似点^^容易防止孢嚢凝集在-^。然而,这并不排除^f鹏本发明的方法中使用津給剂的可能性。例如,可使用例如CMC(羧甲^维素)的粘合剂,其在将孢嚢引A^^f^养基中时溶解。拟本发明的方法的另一*选实施方案中,在应用到孢ILL之前,至少90wt。/。的磁I"顿粒具有的尺寸小于10nm,储小于5|im,更舰小于1nm,并JljL^。该实施方式的一^H^点是这种小颗丰M"孢嚢的附着比;^粒更好。一_5^皮包Wj孢ILb^,磁f生颗粒可在孢ILh形舰大的^^物(结晶),特别J^il可能部分是因为磁f顿粒之间的舰引力絲的。本发明还涉及才本发明的方法可得到的孢嚢,特别是卣虫孢嚢。这些孢嚢的特征在于^^有应用到它们的外表面上的>^'^^粒。最后,本发明还涉及一种由才娥本发明的孢嚢开始生产自由游动的活食用生物的方法,其中孢^fe^f说养基中孵育,使#^分孢嚢^(匕^#^出自由游动的活食用生物,其中自由游动的活食用生物与未孵化的孢嚢和空孢嚢壳分离开来。才娥本发明,在=赙育步骤^,通it^^及引将磁l"顿粒应用到在其^"用生物分离。通过才娥本发明的方法和孢嚢的一些具体实施方式的描述,本发明其它特别^t和优点将变得显而易见。在该说明中使用的参照数字与附图有关,其中图1显示了^f匕槽的示意图,其中带有
>^1失的孢嚢移除装置用;^^(^&it^M产的无节幼体中分离;^f匕的孢嚢;和图2显示了流Mit^置较;U^模的实施方案,其在^f匕步,通过将孵^^养基引^it过该装置,負^UL节幼体中磁性分离^Wf匕的孢嚢。本发明旨在提^""种从孢嚢^f匕的自由游动的活食用生物中分离^f^嚢,以及^i&的空孢嚢壳的新的有益方法。所述孢嚢特別是卣虫孢嚢,但是本发明还可以应用于其它类型的孢嚢上。而且,术语孢嚢意味着不仅包^f皮包含在夕卜壳内且肯^1快(在一天或两天内)^f匕的胚胎,同时还包括^f匕前胚胎还M育的卵。因此,本发明还可用于如其它7K生动物的孢嚢(卵),例如轮虫、淡水卤虫等。然而,本发明的主要应用是卤虫孢嚢,因此,进一步的描述仅参照这类卣虫孢嚢和由卣虫孢囊!^f匕出的自由游动的无节幼*出。卣虫孢i^EX大洲散布的高itl(hypersaline)湖泊、沿海iipt湖和太阳盐场(solarsaltworks)的沿海岸线一带可大量获得。在^后,清洗孢嚢并将其置于盐溶液中係存数月。接着,在将它们处理(用淡水清'3t/冲洗)后,干駭含水量低于15wt%。当在海水中孵育时,这些孢囊树出可直辦为营养活食来源喂养多种海生和淡水生物的幼虫的自由游动的无节幼体,4吏得它们成为水生^SJ^更利、劳动密集性最少的活食。可^UU于^ff匕卣虫孢嚢的絲l的实例参见图L在实施中肯將到絲^f匕结果的容器1具有形成圆锥形底部3的壁2,并JL^1部充气。圆筒形或正方形底的槽具有盲点,卣虫孢嚢和无节幼体聚集
^E,并JLii受氧^C^。透明或半透明的^H有利于检查粉匕悬浮液,尤其是当时。iH^卜,絲1可装配至少一个光源4,其位于圆锥底部分,以在M无节幼体前将它们吸引到底部。1中跑U^t^,停止充气,使得大多WJ^(匕的孢嚢能沉降到底部3,并且大多数空孢嚢壳能漂浮到^f说养基的表面。M1在底部有出口5,这#^有自由游动的无节幼体的孵^^养基能流出到if争子上。为了避免必须从^f^养基中筛除,化的孢嚢,或者为了减小必须^f憐养基中筛除的未Hff^&嚢的量,此时^^^兹分离法。才緣本发明,向引AJiJ^f膽养基中的孢嚢的夕卜表面^f^J磁f^^立。这样,通it^^及引可将^J^匕的孢嚢和空孢嚢壳从自孢囊H^匕出的、不含磁顿粒的自由游动的无节幼体中分离出来。这种分离可采用不同的方式进行。在^f匕步聯,可将包括一个或多个^l失7的孢嚢除去装置6放^J'J^fft培养基中,这样^J^f匕的孢嚢和空孢嚢壳被该装置6吸引并粘附到^^失7上。为了还能除去位于容器底部的未^f匕孢嚢,孵^^养基可自容器底部向^顶部循环。按这种方式,会有更少的^f挑嚢到达孢嚢筛中,使得当磁力分离^^够有效时,不再需要^Jl^膽养基中筛去^f可,f匕的孢嚢。除了将孢嚢除去装置6;^f^'J^f^H内,还可以在^R^1的壁上,特别是其圆锥底3上提[个或多个^l失8。按这种方式,当通过出口5排空容器1时,未^ft的孢嚢和空孢嚢壳将粘附到位于》翁失
8的容器1的壁上。在^f膽养基内孵育孢嚢的过程中,^^失8^t^J^去,这样通过t的空气能够将孢嚢更均匀的分布在粉说养基中。当磁铁8不是永久》翁失而是替代为电磁石8时,中断电流也可代替移除电磁石8。被itf^'J^f说养基中的孢嚢除去装置6的f翁失7也可以是电磁石,但为了减少电气事故,伏i^jc久^^失。除了在^f膝器自身中磁分离^f战嚢外,还可以在-^itit^置内从无节幼体中分离^ft^嚢和空孢囊壳,其中^f膽养J^皮引j;純ii^少一个^4失,这样;^lff^嚢和^f可空孢囊壳被粘附到^l5Ui,而无节幼体不被吸引而通过磁铁。这种i^iiit^置的实例参见图2。其包括具有入口IO和出口11的延伸室(elongatedchamber)9。延伸室9用具有磁力^f辦冈的钢棉12(或其它抗腐蚀的铁磁'船帛)填满,并且用电圏13包围,这样可^1伸室9中产生磁场。《附帛12因此可被磁化,这样就形成了吸引絲磁小顿粒的^f^嚢或空孢嚢壳的^l失。由于4贿12的表面积大,化面积能保留iMff匕的孢嚢或空孢囊壳,从而iift^i战置肯M皮制造的非常致密。关于这类磁分离装置的进一步详细描迷可参见US3676337,其&Mt为参都她入。8t点是提供在其外表面上具有有磁l^粒的孢嚢。本发明人已发现,通过将磁,粒应用到孢嚢上,未^f匕的孢嚢和空孢嚢壳不仅育沐^kA生产的无节幼体中分离,而且重要的是孢嚢还能以成本效率的方弍月所需量的磁
4^la&^皮。磁性颗粒能以粉末的形^用于孢ILh。^tit种情况下,当在孢IUi应用粉末时,^^*有湿润表面(不能自由流动),以便磁性颗粒更好地附着到孢lth。所ii^末特别是可以在已经将孢嚢M溶液中取出后、#干燥前应用到孢ith,使得它们仍然具有湿润的表面。^fe这种方式,孢嚢必须^5l干燥一次,特别是含水量低于25wt.%,>^^含水量低于20wt.%,更^it含水量低于15wt.%。因为液体悬浮、_容易应用,磁性颗粒M以液体悬浮液的形式应用到孢ILh。磁性颗粒可悬浮絲才A^剂中,例如悬浮到植物油或乙醇中,但它们优选悬浮到水溶液介质中形成水悬浮液。如前所述,该悬浮液特别地在干燥到上述含水量前喷雾到湿润孢IUi,或者喷雾到干燥的自由流动的孢ILh。当4^]水悬浮液时,干孢嚢的表面变得湿润,^a^会很快被干孢嚢吸收,这样当,孢嚢时,它们很f夬又能自由流动。当孢狄够干燥,并JW^]了用量足够少的水悬浮液时,已处理的孢嚢的(内)含水量可##在25wt.%以下,M20wt.%以下,或者甚至是15wt.。/。以下。然而,当应用了水悬浮g,孢嚢可再次被干^ii^这样的低含7JC量。这种低含水量的一扭点是在应用磁I"顿fe^,孢嚢負^皮^^并在^^前常规^^数月。将孢嚢再次干燥的另一^L点是磁小顿粒对所述孢嚢的附着明显更强,因为当在将孢嚢引Wj^f膽养基之前,第一次干燥可使磁力分离更有效。除了,先成型的磁性颗粒应用于孢IUi外,磁f顿津iii可以例如以包衣的形
^孢ILb^位形成。^^说明书和权利要求书中財虑了磁^#料的包衣作为应用到孢ILh的磁I^粒,因为包衣时,甚至是连续的包衣,^tM目当易碎,并且能轻易^^可^f说嚢的磁t"顿粒。如在W004/057952中所述的,孢嚢的壳能与过m盐(特别是与过锰酸钾)反应,在孢ILh产生二氧^^层。在W004/057952中,这种二氧^l^g:I^^J^去以生产自的孢嚢,树娥本发明,不必去除二氧^4^,而是可用^M^产的无节幼体中磁分离孢嚢和孢嚢壳。所i^^'^^立可以由《^^性、亚^^'l^il者甚至是顺磁I^^l^得。然而,纟jy^W"种亚《^^^H"料是M的,因为它们获得M节幼体中分离孢嚢和孢嚢壳所需磁力的磁场更小。磁^^粒^i^包括一种或多种i^度金属的氧化物,特别是一种或多种选自下述的氧化物Cr02(氧4b^(IV))、CoFe必(钴铁氧体)、CuFe204(铜铁氧体)、Dy3Fe5012(镝铁磁性石榴石(dysprosiumferrogarnet))、DyFe03(镝正铁氧体)、ErFe03(铒正铁氧体(erbiumorthoferrite))、Fe5Gd30i2(4L4失磁'I^榴石(gadoliniumferrogarnet))、Fe5Ho3012(4^4it5榴石(holmiumirongarnet))、FeMnNi04(4失4N^IL化物(ironnickelmanganeseoxide))、Fe203(磁赤4MH、Fe304(繊jM^(magnetite))、Fe203(赤4stf户)、FeLa03(镧铁氧体)、MgFe204(镁铁氧体(magnesiumferrite))、Fe2Mn04(锰铁氧体)、Mn02(二氧化锰)、Nd207Ti2(二钬酸钕