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凝血酶原时间(PT)测定
凝血酶原时间(PT)测定
(分析仪器法)
1 实验原理:凝固法
确定量的血浆(50微升)样本经一定时间加温后,加入PT试剂,采用波长660nm的光照射样本,凝血过程中血浆的混浊度可以通过测量散射光光强度的改变来测定,然后通过标准曲线求出凝血酶原时间,再通过参数计算得出凝血酶原活动度及INR值。
2 标本采集
早晨空腹采血(空腹12小时左右),静脉采血。
%(w/v)+,混匀。
3 标本存放
1小时内(3000r/min×15min)分离血浆,室温放置不超过2小时,2~8℃保存不超过4小时,长时间保存需在冰冻条件下,(-70℃不超过6个月),只能冻融1次,在37℃迅速解冻,以减低凝血因子的消耗,解冻后立即测试。 4 标本运输:低温条件下运输。
5 标本拒收的标准:抗凝剂不符合,采血量不准确,凝固,溶血,脂血标本不能作测定。
6. 实验材料:
德国Dade Behring Marburg 公司凝血酶原测定试剂,每瓶加4ml蒸馏水溶
解(40人份),未开封试剂2~8℃贮存到说明书上有效期,复溶试剂2~8℃保存不超过5天。
Dade ,才能使用或分装。
复溶后,室温保存2小时,2~8℃4小时。
7. 仪器设备:
仪器名称: Sysmex CA-1500全自动血液凝固分析仪
仪器厂家:日本Sysmex公司
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仪器型号:Sysmex CA-1500
仪器技术参数:
速度: 最快检测速度180测试/小时,组合检测约140测试/小时
试剂位:36个,具冷藏功能。
样本位:50个,可自动连续添加。
仪器校准程序:
校准频率:当方法改变,试剂厂家或试剂型号改变,仪器维修影响测定结果
等情况时,必须进行校准。
校准操作:设置标准曲线分析(由仪器提供商指定工程师执行)
8. 操作步骤:
检查前准备:
清空废液瓶,清空反应杯抛弃槽。
添加足够反应杯(不能超出警告线)。
添加清洁液试剂,清洗用蒸馏水等。
开机
先开打印机再开主机,开机后仪器自检,约15分钟,屏幕上方“Not Ready”变为“Ready”,表示仪器预热完成,进入系统准备工作状态,可进行测定。
输入工作清单:
从主菜单选
,选
输入第一个样本号→按相应实验项目名称键并同时输入此标本的其他
测试项目,若选“凝血四项(PT、APTT、Fbg、TT)”,可按
选项选择,选中项目相应位置标记为“○”,选完项目后按
删除某项目时只需按该项目(按键如
同样输入其他标本编号项目。(快速输入可用复制同样项目的输入。
放置样本
,并按顺序把样本架排列于
Sampler进样器右边位置(最多同时放5架共50个样本)
按.
盖好遮光盖,确认仪器为准备状态(显示屏正