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实验二食品中亚硝酸盐含量的测定
实验二肉质品中亚硝酸盐含量的测定(比色法)
一、原理和目的
(一)原理:
样品经沉淀蛋白质,除去脂肪后,在弱酸条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化,再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料,其最大吸收波长为550 nm,可测定吸光度并与标准比较定量。反应式如下
+NNSO3HSO3HNO
H
2N

2CH2NH2SO32
(二)目的:
我国是农业大国,化肥的大量使用主要造成了食品中硝酸盐的污染。硝酸盐进入人体,产生直接毒害和慢性毒害,因此硝酸盐的检测具有特别重要的意义。此试验是应用比色发来进行硝酸盐的检测。
二、试剂
(1) 氯化铵缓冲溶液,~:1L容量瓶中加入500ml水,准确
,摇匀。准确加入50ml氢氧化铵,用水稀释
至刻度,必要时用稀盐酸和稀氢氧化铵调pH至所需范围。
(2) :称取120g硫酸锌(ZnSO4·7H2O),用水
溶解,稀释至1L。
(3) 20g/l氢氧化钠溶液:称取20g氢氧化钠,用水溶解,稀释至1L。
(4) 对氨基苯磺酸溶液:称取10g对氨基苯磺酸,溶于700ml水和300ml
冰乙酸中,置棕色试剂瓶中混匀,室温贮存。
(5) 1g/L盐酸萘乙二胺溶液:,加100ml60%乙
酸溶解混匀后,置棕色试剂瓶中,在冰箱贮存,一周内稳定。
(6) 显色剂:临用前将1g/L盐酸萘乙二胺和对氨基苯磺酸溶液等体积
混合,临用现配,仅供一次使用。
(7) 亚硝酸钠标准贮备液:
亚硝酸钠,加水溶解移入500ml容量瓶中,加100ml氯化铵缓冲溶
液,加水稀释至刻度,混匀,在4℃避光贮存。此溶液每毫升相当
于500μg的亚硝酸钠。
(8) 亚硝酸钠标准使用液:准确吸取亚硝酸钠标准贮备液,稀释100倍,
临用现配,此溶液每毫升相当于5μg的亚硝酸钠。
三、仪器:小型铰肉机,分光光度计,组织捣碎机,恒温水浴
四、操作步骤
(1)样品处理:,置于组织捣碎机中,加70ml水和12ml20g/L氢氧化钠溶液,打碎,混匀,测试样品溶液的pH,