大花蕙兰繁殖技术手册.doc大花蕙兰繁殖技术——组织培养繁殖
一、组培操作
在春季2~4月大花蕙兰新芽萌发期,选长8厘米左右的新芽从基部与老假鳞茎相连接处切断。尽量采用露在外面,不被栽培材料埋起的芽。采芽前数日减少叶面喷水,可减少菌类污染。采下的芽先用肥皂和流动自来水冲洗10~15分钟,然后在无菌条件下切去芽的上半段,并剥除最外面的1~2枚叶片,在95%的酒精中蘸一下(1~2秒),立即浸泡在10%的次氯酸钠水溶液中。10分钟,稍加摇动。取出后立即用无菌水冲洗,再剥去2~3片叶,放入5%次氯酸钠水溶液中,5分钟后用无菌水冲洗,剥至留下最后一枚叶片。以生长点为中心,~,浸泡在1%次氯酸钠1分钟后取出,用无菌水冲洗数次,用解剖刀切成数块,分别放入已准备好的培养基上。每瓶最好只接种一块外植体,以免相互感染。
切取生长点的大小依培养目的不同而异。在大花蕙兰茎尖培养中,再分裂增殖的部位不仅在生长点部分,生长点与叶原基的中间也有较强的分生能力。切取茎尖时带有两个左右的叶原基,即较大的组织块效果较好。
二、培养和增殖
接种好的培养瓶放在室温20~25℃,有明亮的散射光或日光灯下15~20厘米,光照强度在2000勒克斯左右,不可阳光直射,每天光照时间12小时左右。4~6周后可在外植体周围形成许多球状物,即类原球茎。若把类原球茎分割或用棒压碎,再接种到培养基上,便会形成更多的类原球茎。每30~40天分割一次,大花蕙兰每切一个芽可繁殖1万苗左右。把类原球茎接种到长苗培养基上,可以长芽生根,形成完整的幼苗。
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