Flowjo
,将需要分析的样本复制到文件夹内(一个文件夹内放一个指标的所有样本,便于统一操作);
(Drag Samples Here)
4两种方法处理
以Th17细胞(CD4/FITC,IL-17A/PE)为例
方法一:圈阳性细胞(更适用于两标记)
设置阴性对照样本
双击阴性对照样本(一般编号为001)出现以下窗口
→Use Log Axis,横轴、纵轴同样操作,出现细胞
:单击上面的正方形(或者椭圆或者四边形),在细胞上圈出较明亮的区域(无需更改命名)
,弹出另一窗口
:p-FL1:: FL1 Log(1通道)
依次单击横轴FS:FS Lin,出现以下窗口
+T细胞细胞:用同样的方法在细胞群上方圈出CD4阳性区域),并命名为CD4,如下:
-17A阳性细胞:双击以上所圈细胞,弹出另一窗口。用以上同样的方法圈出IL-17A阳性的T细胞,得到如下图
以上便为阴性对照的设置过程(注:因此样本为阴性对照,须保证双阳(CD4+ IL-17A)比率均小于1%(或2%))
5平行操作所有样本:将阴性对照的结果拖至上面的All Samples中,此时所有样本即被分析,如下:
方法二:画象限
设置阴性样本
:p-FL1:: FL1 Log(1通道)
选通道2:p-FL2:: FL2 Log(1通道)
出现以下窗口:
:如下
注:保证
Flowjo 7.6.1使用方法 来自淘豆网m.daumloan.com转载请标明出处.
