[优秀论文]猪无细胞真皮基质作为真皮支架材料的研究.pdf

上海第二医科大学
博士学位论文
猪无细胞真皮基质作为真皮支架材料的研究
姓名:吴秋合
申请学位级别:博士
专业:外科学(烧伤)
指导教师:许伟石

猪无细胞真皮基质作为真皮支架材料的研究中文摘要弧⒀芯勘尘全层皮肤缺损创面的修复是外科领域的一个基本问题,全层皮肤缺损生物相容性良好并可被机体吸收的生物材料上形成复合物,、器官的病损部分,细胞在生物材料被机体降解吸收过程中,形成新的在形态和功能方面与相应器官、组织一致的组织,从代物的研究、种子细胞的离体培养、组织工程化组织对各种病损组织的替重要方面,它不仅影响表皮细胞的生物学行为和培养效率,而且决定着移植后能否与机体很好地适应、结合和修复的效果,是限制组织工程化皮肤代物中,无细胞真皮基质是近年来的研究热点之~。由于无细胞真皮基质从而可避免移植后的急性排斥反应。另外无细胞真皮基质在结构上保留了\不仅需要创面及时和永久的覆盖而且要能最大限度地恢复功能和外观。目前能够永久性覆盖创面的移植物是自体皮,移植较厚的自体皮虽然即能解决创面覆盖问题,又能解决外观和功能问题,但在供皮区却留下一个新创面,且愈合后容易产生瘢痕和色素沉着等并发症。表皮细胞培养、微粒皮移植、混合皮移植、网状植皮等技术的出现能够解决创面及时和永久的覆盖,但却不能很好地解决创面愈合后的功能和外观问题,因此全层皮肤缺损创面的覆盖问题仍然是一个尚未解决的问题。近年来组织工程学的出现为解决全层皮肤缺损问题提供了崭新的思路和方法。它主要是应用细胞生物学和工程学原理,研究开发修复和改善损伤组织结构和功能的生物替代物的一门科学。其基本原理是将体外培养扩增的正常组织细胞吸附于一种而达到修复创伤和功能的目的。它主要包括三方面的内容:细胞外基质替代研究。种子细胞、细胞支架和生长因子构成了组织工程化产品的三个要素。就皮肤组织工程而言,真皮替代物的研究就成为皮肤组织工程的一个构建的一个瓶颈。多年来人们已开发出多种真皮替代物,在众多的真皮替去除了抗原性很强的细胞成分,保留了抗原性相对较弱的细胞外基质成分,堕无细胞真皮基质作为真皮支架材料的研究上海第二医科大学博士学位论文、、
胞真皮基质在体移植后的稳定性≯峁褐砦尴赴嫫せ视氡∽蕴迤じ、、、、周取标本,通过大体观察和组织学观察研究猪无细天然真皮的基本框架和完整的基底膜,更接近于正常真皮结构,可能更适合作为皮肤组织工程的支架材料。基础研究和临床应用均表明异体无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植或与表皮细胞膜片复合移植后,能够以真皮支架为模板再生出接近正常真皮的新生真皮,大大改善了创面愈合质量,达到较好的功能和外观,目前异体无细胞真皮基质已商品化。但异体无细胞真皮基质存在着来源有限、价格昂贵等缺点,异种无细胞真皮基质的开发和研究成为人们关注的热点。目前猪无细胞真皮基质在临床上的应用逐真皮基质在体移植后的稳定性、炎症反应、免疫反应及在体移植后是否有利于基底膜重塑和对细胞外基质的影响等问题。因此本研究以大鼠全二、研究目的谝徊糠种砦尴赴嫫せ试谔逡浦埠蟮奈榷ㄐ目的:观察猪无细胞真皮基质在体移植后的稳定性。方法:以大鼠为动物模型,在其背部造成娜ú闫し羧彼稹4笫笏婊治1∽体皮移植组和猪无细胞真皮基质∽蕴迤ひ浦沧椋直鹩谝浦瞝、、合移植后皮片成活率与薄自体皮移植组无显著性差异,复合皮移植后愈合皮肤比正常皮肤薄,无弹性。猪无细胞真皮基质早期完整,随着时间的推渐增多,而且取得了较好的修复效果,能否以猪无细胞真皮基质为支架构建出适合于临床应用的人工皮,尚有许多基础工作要去研究,如猪无细胞层皮肤缺损为模型,对猪无细胞真皮基质在体移植后的这些基本问题进行了探讨,以期为猪无细胞真皮基质的临床应用和作为组织工程化皮肤的支架材料提供依据。鄄熘砦尴赴嫫せ试谔逡浦埠蟮奈榷ㄐ教种砦尴赴嫫せ试谔逡浦埠蟮难字⒎从懊庖呋教种砦尴赴嫫せ试谔逡浦埠笫欠裼欣诨啄さ闹厮教种砦尴赴嫫せ试谔逡浦埠蠖韵赴饣实挠跋丫三、/罚日究内容创面外观平整,色泽与周围皮肤相似,柔韧有弹性,而薄自体皮组移植区上海第二医科大学博士学位论文猪无细胞真皮基质作为真皮支架材料的研究
自体皮移植组不表返瀛:猪无细移植物未被排斥面磊与移植区局部堂塑三垦型盔鲎竖圭兰垡丝苎期内未见急慢性排斥反应。结论:采用一步法将猪无细胞真皮基质与薄自植后周,在真皮的网状居仍可见到残留的猪真皮基质。在周的观察皮肤局部疶细胞因子的表达。峁褐砦尴赴嫫せ室分布均匀,而薄自体皮移植组基底膜模糊不连续,半桥粒少。崧郏褐砦测层粘连蛋白、Ⅳ型胶原在基底膜的表达,透射电镜观察基底膜超微结构。~结果:在复合皮移植组各时相点基底膜层粘连蛋白和Ⅳ型胶原的表达均高堕玉塑堕塞鏖苎巫堡垄塞鏖奎茎盟型箜堑塞移,猪无细胞真皮基质逐渐被降解,并被自体新生的胶原所替代,直到