胞外抗氧化酶类酶活力的测定
原理:在碱性条件下,邻苯三酚发生自氧化反应,并产生O2-,在SOD存在下,自氧化反应受到抑制。
参考邻苯三酚测活法(Marklund 法)孙[66], Tris-HCl(PH ,内含1mM EDTA)和ddH2O,25℃恒温水浴20 min,加入1 mL 待测液后加入25℃预热的邻苯三酚溶液,摇匀,立即于320nm测吸光值A320, min测定一次,持续测到5 min。
邻苯三酚自氧化法测定SOD酶活力
菌株
空白
自氧化
B
B+AbA
CK
CK+AbA
Mu2
Mu2+ AbA
-HCl(mL)
60mM 邻苯三酚溶液(mL)
0
10mM HCl(mL)
0
0
0
0
0
0
0
ddH2O(mL)
待测液(mL)
0
0
1
1
1
1
1
1
总体积(mL)
10
10
10
10
10
10
10
10
酶活力的定义为:温度25 ℃,pH ,波长320 nm处,在每毫升反应液中,每分钟抑制邻苯三酚自氧化速率达50%的酶量为1个酶活力单位,酶活力按下式计算。
单位菌体SOD酶活力(U/g)=
:1分钟邻苯三酚自氧化时A320的变化量;:加入待测液后1分钟邻苯三酚氧化时A320的变化量;V:待测液总体积;N:待测液稀释倍数;V0:加入的待测液的体积;W:菌体重;V1:反应总体积。
超氧化物歧化酶(SOD)活力测定 来自淘豆网m.daumloan.com转载请标明出处.
