色谱A杂志第1073期(2005年)第201页–´ar-Perl∗,üötvös大学无机及分析化学学院,布达佩斯112,H-1518,32信箱,匈牙利2004年12月2日数据库收录色谱、毛细管电泳和毛细管电色谱技术在黄酮类化合物分析中的应用理学院化学生物学2006级姚琳翻译摘要:目前有一种说法提出使用色谱方法来测定黄酮类化合物,包括游离苷元、相应的苷及其衍生物。根据选择原理,使用下列办法来区分:初步步骤的关键评价(提取/分离和水解)以及分离,鉴定及选择定量的基础研究水平和/或随后各项工作的行动程序。色谱技术在从几种天然矩阵中各种黄酮类化合物的提取/分离之后进行讨论。从分析的角度对文献的分类和比较,主要是对色谱,其次是对检测技术的应用。关键词:综述;黄酮类物质的分析;色谱;苷元;黄酮苷引言尽管相关的黄酮类物质以及大量的文献研究与识别和在各种矩阵中不同种黄酮类物质的定量分析,根据作者的知识,最近的文献没有与他们的色谱分析有关的。这其实不是一个机会,这说明相关任务复杂性:以非常特殊的化学,黄酮类化合物的物理特性和结构特性,数量庞大的文献其中包含有许多矛盾。所有这些特点遏止分析化学家不再研究有关的课题。其主要代表的化学结构属于不同类型的化合物,如花青素类,儿茶素类,黄酮类,黄酮醇,香二氢黄酮和异黄酮,见图1。然而,由于黄酮类化合物的内在的特点:(一)准备转型/氧化/还原过程,分子内和分子间重排;(二)它们在数量和羟基基团的位置不同;(三)与各种结构和聚合度的许多糖类联结,一个单一的黄酮类化合物的分子可能非常庞大。考虑到可能物种的多样性,理论上会有超过2×106种黄酮类物质存在,而且当时有超过2×103种物质已被确定。举例来说,仅槲皮素就有超过179多种苷类。这些成分关联的有机物(被视为通用的、有益的影响家具的天然化合物)取决于它们重要的生理/生物和实用的特征。已证实黄酮的多酚类结构和抗氧化特性(在几乎所有植物、蔬菜和水果等中都能检测出来,主要以β-糖苷形式存在),在活的有机体中被吸收得非常快。据流行病学研究显示,含黄酮类物质的蔬菜和水果被证明因为黄酮类物质的抗氧化性能使其对癌症、中风和冠心病等具有一定的预防作用。黄酮类化合物(来源于漆树的赤木质)的抗诱变活性被证明对溴代苯处理过的大鼠起作用。因此,在这些类型的天然化合物的有用性和重要性的基础上,可以看出需要总结这些色谱程序。图1黄酮几种主要类型的化学结构毫无疑问,对黄酮类化合物的全面分析,包括分析它详细的结构、环的位置的配置、双键的数目、自由和取代的羟基、附加的取代环,这些都需要分析化学家的合作完成,以及在色谱法、核磁共振法(NMR)和质谱法(MS)中获得的有效的、先进的分离和鉴定技术。当然,这个任务最好的解决办法也许是一个高效液相色谱-质谱-核磁共振仪器能同时满足所有这些要求。不幸的是,只有少数几个实验室都装有这种相对较新的系统。不过,更简单的方法,如高效液相色谱法(HPLC法)、毛细管电泳法(CE)、毛细管电色谱法(CEC)或气相色谱法(GC)可以在识别和定量过程中提供非常有用的信息,同样,陈列出出色的分辨率和选择保留时间。色谱的完成大多不同,在绝大多数情况下会结合探测系统[高效液相色谱:紫外-荧光(FL),光电二极管阵列(DAD)-FL,紫外(DAD)-质谱;气相色谱:气相色谱-火焰离子化检测器(FID),气相色谱-质谱,气相色谱-质谱-质谱]加强分析结果的确定性指数。因此,可以理解其特殊性以及联用技术的有限课题对有关的黄酮类化合物进行了综述:如使用质谱对黄酮苷进行鉴定/结构研究,利用联用技术对豆科植物中黄酮的植物化学成份研究和利用液相色谱-质谱联用系统分析食物中的黄酮类化合物。编写本文的目的,主要是对90年代后期以及2000-2004年期间重点刊物所发表的关于黄酮类化合物全部的色谱层析方法(包括提取/抽提过程、分离、通过不同色谱技术的鉴定和定量)进行综述和评价。论文分类的原则主要根据色谱,其次是对检测技术的应用;从分析的角度来看,选择的主要依据是对确切的测定步骤进行分析。,独立地对其后的应用色谱层析和检测方法例如HPLC,CE/CEC或GC进行模式研究的排除,同时对分离过程进行早期预测,以对在干燥草本样品中或是保存基质条件下的芦丁进行分析。选定黄酮类化合物的提取/分离过程是根据芦丁的情况见下表(Table1)。其次,提取的典型方法,是甲醇与水溶液的萃取和固相萃取法(SPE),经证明,这两种方法几是最常用的(表1,–)。在浏览500多篇论文的基础上(详细阅读133篇),可以很清楚的发现,通过传统方法寻找最佳条件,即一个个地确定大量的参数,这仍然是一种幻想,它意味着:相对分析
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