表达ZJ-1株新城疫病毒F基因重组鸡痘病毒筛选与免疫效力试验.pdf

《救诤匣虻闹刈榧Χ病毒的筛选及其免疫效力试验刘秀梵教授导师:研究生:张体银中文摘要菇吮泶颋基因的曛刈榧Χ徊《盨、.接种为主来控制该病,常用的油乳剂灭活苗和弱毒活苗对该病的控制起到重要作蛂,并对其进行遗传稳定性分析和免疫效力试验。取刈椴《綝为模板进行衫┰龀鲈糽‘刈椴《镜亩锸匝重组病毒对Φ拿庖咝Я新城疫是由新城疫病毒鸬那堇嗟牟《拘源静≈唬泛流行于世界上许多国家和地区,给养禽业造成了巨大的经济损失。舾闭病毒属,其病毒囊膜由两种蛋白组成,其中之一为融合蛋白現斡病毒的融合与穿透,在疾病的免疫保护方面发挥着重要作用。我国目前仍以疫苗用,但其存在生产成本高,易散毒,使用后干扰疫情监测等缺点,因此,有必要研制新一代安全高效的基因工程疫苗。《镜纳秆〖捌湟糯榷ㄐ圆舛利用凶H荆直鸾ê蠳转移载体蚉株和大空斑鸡痘病毒共转染鸡胚成纤维细胞ü栋呱秆。玫酱炕闹刈椴《緍一蛂试验表明重组病毒基因组中含有颍患浣免疫荧光试验砻髦刈椴《局械腇基因能够得到表达。。间接免疫荧光试验表明,重组病毒传代后虻谋泶镂词苡跋臁因片段。取甋和的鶳产物进行测序后与转移载体中的蛳啾龋塑账岷桶被嵛奕魏伪浠允玖烁弥刈椴《揪哂良好的遗传稳定性。樟銼鸡随机分为椋衅は陆又諻、瓻、虻的张体银:表达新城疫病毒虻闹刈榧Χ徊《镜纳秆〖捌涿庖咝Яκ匝—
替代传统灭活苗的步伐,并将为的防制带来新的技术手段。来评价重组病毒的免疫效力,结果除槿ú克劳鐾猓溆嘧榫%保护。重组病毒对商品鸡的免疫效力观察天,其保护效率籗、、籗和籗分别为%、%、%、%;油苗和直鹞%、τ眉浣覧检测鸡痘病毒抗体方法的初步建立应用┰龅募Χ徊《提纯后作为抗原建立了具有较高特异性和灵敏性的间接椒ɡ醇觳釬抗体。通过方阵滴定法来确定抗原最佳包被浓度为/,待检血清最佳稀释倍数为,,其阳性检出率为.%/。此外,将该方法与琼脂扩散试验进行比较检测血清样品,结果显示本方法的灵敏度比琼脂扩散试验灵敏倍,而且还有特异性综上所述,本试验成功筛选了曛刈榧Χ徊《荆⑶揖哂辛己玫囊糯榷性,对δ芴峁%的保护。该疫苗的研制成功将会加速新型基因工程疫苗关键词:重组鸡痘病毒新城疫病毒融合基因遗传稳定性免疫保护效力/只,油苗为/只,免疫后周龄用闚进行滴鼻攻击。通过固逅胶捅;ば将日龄商品鸡随机分为椋坏牧糠直鸾玏、—和进行皮下接种,油苗为只,另外设空白对照组。免疫后天以闚滴鼻攻毒,强,操作简便、快速等优点。间接、籗和扬州大学硕士学位论文:
.,,瑀瑀,一瑀..,篜甃,琣瑆、.甌
堑塑查堂堡主堂堡垫壅.%/.珏%,%,%,%—籗,—%,琲,,,.琣,,—疨,..,,。’·
;:甋籒籭;
符号说明堡堡堡篌盟苘眼账荞薹堕塑重丝苎堡塞壁箜堡垄墨壁墨壅塾垄苎竺琼脂扩敞试验氨苄青霉素鸡痘病毒聚合酶链式反应无特定瘸原溴一宦纫一嵋籅—碱基对鸡胚成纤维细胞鸡胚半数致死量噶C庖呶绞匝融合异硫氰酸荧光素血凝血凝抑制免疫荧光试验千碱基话肴樘俏裘分钟毫井摩尔浓度新城疫《磷酸盐缓冲液蚀斑形成单位重组鸡痘病毒转/分秒微克半乳糖天小时/%籫一一籭疘痩~癷——
综述:新城疫疫苗研究进展”俊1静晔状畏⑾钟谟《饶嵛餮堑淖ν鄣和峦暧址⑾钟谟⒐鲁⒒钜呙要侵害者——,到年代初传到欧洲⋯‘”浚挥捎诟么未罅餍卸孕矶喙已菀档难现赜跋欤佣俳艘呙新城疫琋是由新城疫病毒引起的一种烈性病毒性传染病,是当今全球范围内最严重的家禽传染病之一,也是我国所有鸡病中危害最大的一种,被国际兽疫局形狝类传染病大流行:首次爆发似乎起源于东南亚,然后该病慢慢传播到欧洲,直到年代晚期,由于疫苗的广泛使用才逐渐平息下来幌啾戎拢诙未罅餍杏甏后期,,传播较快的原因可能是由于当时养禽业的快速发展使其成为一个具有巨大国际贸易的产业,,是疾病传播的一个的研制和对家禽有艘防疫制度的制订。另外对进口笼养鸟也实行了新的措施,但对于新城疫潜在来源的另一种家养禽类却被忽落,””辏英国还感染到鸡,由于污染了鸽饲料而引起未免疫鸡群次爆发该病“。而进入年代以后,发生于亚、非、欧和南美洲以及中东地区的被许多学者认为是该病第四次世界范围的大流行。本病的多次流行给世界养禽业造成了巨大的经济目前,在我国全国范围内发病仍然比较普遍,它制约着