表达新城疫病毒HN基因的重组鸡痘病毒与免疫效力.pdf

表达新城疫病毒基因重组鸡痘病毒的构建及免疫效力至兰堡ǘ榍档孥账苣董垦重塑堕垄塑塞塑塑蕉墨叁壅墼垄一种禽类烈性致死性传染病,是危害我国畜牧业的驛类病之一,目前我国物实验证实了该重组病毒免疫竽芄煌耆ǖ挚筃强毒的致死性攻击,代的重组病毒的基因。测序结果发现代和代基因仅有黾基发生变异,氨基酸序列没有变异。应用转瓶分别培养了三个代次的重组病毒,专业:研究生:李军伟新城疫是由副粘病毒科的新城疫病毒对该病的控制主要靠常规疫苗的免疫接种,但常规疫苗的免疫接种常常引起免疫失败,同时又干扰该病的流行病学监测,为了克服常规疫苗的这些缺点,在早期然而免疫含有母源抗体的商品鸡商品鸡后只能提供部分免疫保护,基于此,本研究用毒力相对较强的鸡痘病毒作亲本病毒,通过同源重组方法将基因插入中,构建了能够正确表达基因的重组鸡痘病毒籋并对其遗传稳定性和免疫效力进行评估。首先,,经含有挠Q琼脂覆盖后挑选蓝斑,多次克隆纯化后获得纯化的重组鸡痘病毒,以椒ㄈ范℉虺晒Σ迦氲紽诤图浣用庖荧光试验证实了能够正确表达蛋白。将在狭螅肞方法扩增出原代、代、结果显示各个代次的重组病毒的产量没有发生明显的变化,な盗巳龃的重组病毒均能正确表达蛋白,进一步表明了褽具有较好的遗预防兽医学导师:刘秀梵教授中文摘要琋鸬工作中,本实验室构建了表达基因的重组鸡痘病毒.,经动掠危竦米R传稳定性。
关键词:新城疫病:基因;重组鸡痘病毒:遗传稳定性;免疫保护效力;、腿榧撩鸹蠲/只校現发现和、’免疫组诱生的抗体效价均低于油苗免疫组的固逍Ъ邸5庖呒芄煌耆ǖ挚筃强毒的致死性攻击。%、%。对蜕唐芳κ笛橹芷谀诘奶逯亟蟹治觯峁砻髁街植煌羽诿庖吆、、、日龄分别采血;分离血清:作抗体检测,结果用含有残余抗冈纯固宓樟渖唐返凹忻庖咝Яκ笛椋峁发现,由于母源抗体的干扰,甀汀谏唐芳μ迥谟丈抗体效价明显低于油苗组的抗体效价,免疫天后用剂量为羽的慷镜伪枪ザ荆峁⑾謜瓼免疫组和空白对照组的实验鸡全部死亡,油苗、瓾蛂的免疫组的免疫保护率分别为ァ毒力的重组鸡痘病毒对蜕唐芳Φ纳っ挥忻飨缘挠跋基因的重组鸡痘疫苗有良好的遗传稳定性,在一个亟待解决的问题。综上所述,表达鸡上能对慷镜墓セ魈峁%的保护,但在商品鸡母源抗体的干扰仍是扬州大学硕士学位论文
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第一章新城疫病毒唧基因的表达和鉴定基因插入质粒后将质粒转入减毒沙门氏菌,可证明鞍自新城疫是由新城疫病毒引起的禽类的烈性传染病,在世界范围内给养禽业造成了巨大的经济损失,被国际兽医局列为啻静。年本病首次发现于印度尼西亚,同年在英国新城也发现该病流行,因此被命名为新城疫【等证实其病原是一种病毒【俊对新城疫的预防和控制,目前使用的疫苗以弱毒活苗、中等毒力活苗和油乳剂灭活苗为主。同时由于疫苗的广泛使用,从现场鸡群中分离到蚣觳獾固澹荒茏魑狽感染的诊断指标】,因为这些病毒和抗体有可能来为了减少常规苗对监测的影响,基因工程疫苗的研究在国内外实验室得到了广泛的开展。美国农业部已于年正式批准生产重组鸡痘活载体疫苗,此疫苗效果与常规疫苗效果相当【俊D壳埃谕饧撼晒Ρ泶颪因的报导很多:却唇巳碌母俗床《颈泶锵低硔,王兴龙等【和等【恳惨愿俗床《颈泶锵低吃诶コ嫦赴晒Ρ泶锪薋蛋白。年等利用火鸡疱疹病毒构建了表达菇酥刈镠,萴斯菇ǖ牟錘虻南咝灾柿R材苡盏蓟宀咚降目笷的抗体。龚伟,金宁一等【虻牟迦胫柿T贖赴斜泶铮浣用庖哂ü庵っ髦组质粒转染的细胞出现特异性荧光主要分布在细胞膜上。方维焕、梁雪芽沙门氏菌中表达。痘病毒载体是近年来研究得最深入和广泛的病毒载体,等【来自毒株虻膃迦攵幻绮《驹靥錞蛑兄糜赑动子调控之下,,自疫苗毒株。的重组取璊构建了表达闹刈镮型马力克氏病病毒。陈敷言、张雪莉等用构建的等【将曾将了重组痘苗病毒表达堑鞍拙哂忻庖咴缘谋;ぷ饔谩H欢捎谥刈槎幻病毒对人和家畜有潜在的危险性而限制了它在人畜疫苗生产中的应用,于是,禽。:表达新城疫病毒蛑刈榧Χ徊《镜墓菇ḿ懊庖咝Я
痘病毒载体构建的重组病毒,以不同剂量、鹏免疫后,达基因的重组鸡痘