一、GC(Gaschromatograph)工作条件仪器:GC-14B型气相色谱仪(日本岛津公司)毛细柱:NUKOLTMCapillaryColumn(Supelco);-07B30m××:色谱柱采用毛细吸管柱,柱温130℃,汽化温度180℃,采用氢离子火焰检测器,检测温度180℃,载气为氮气,压力为60KPa,氢气压力为50KPa,氧气压力50KPa,灵敏度(档)为101,、(1)配制25%w/v的偏磷酸溶液,将25克偏磷酸溶在100mL双蒸水中(2)巴豆酸的配制,,定容到100mL。(3)标准样品,、、、、,分别溶于双蒸水中,再各自定容至100mL。(1)发酵液取(或过滤瘤胃液)VFA测定1ml样品到离心管中,,-20℃冰箱保存过夜,解冻后12000rpm离心10min,取上清液保存,测定前再12000rpm离心10min(,,-。(2)食糜及粪样VFA测定取1克置于离心管中,加入5-10倍的双蒸水,混合均匀。取1mL上清夜,。其它步骤同上。,,上样测出乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸和异戊酸的保留时间。(或浓度)和峰面积可以计算出乙酸、丙酸及丁酸等有机酸的相对校正因子,然后根据乙酸、丙酸及丁酸的重量(或浓度)与其峰面积成正比计算出各个样品中的乙酸、丙酸及丁酸浓度。(样品某酸峰面积值×巴豆酸标样峰面积×某酸标样浓度)某酸浓度(mM)=(样品中巴豆酸面积值×标样某酸峰面积)(如乙酸)连续上样几次,测定其峰面积值,利用某酸峰面积值和内标峰面积值计算其重现率。乙酸重现率变异系数:±
VFA测定步骤与方法 来自淘豆网m.daumloan.com转载请标明出处.
