医学细胞设计性实验报告.ppt

医学细胞生物学设计性实验报告实验项目一:动物细胞融合实验原理两个或两个以上的细胞在自发或诱导条件下合并成为一个双核或多核细胞的过程成为。在通常情况下,两个细胞接触并不会发生融合现象。因为各自存在完整的细胞膜,在特殊融合诱导物的作用下,两个细胞膜发生一定变化,就可以促进两个或多个细胞聚集,相接触的细胞膜之间融合,继而细胞质融合,形成一个大的融合细胞,在自然界的就是细胞融合的过程。细胞融合受精目前,细胞融合的诱导物种类很多,常用的主要有灭活的仙台病毒,聚乙二醇(PEG)和电脉冲。目前应用最广泛的是聚乙二醇,因为它易得,简单,且融合效果稳定。实验用品(1).材料:鸡血。(2).试剂:Hanks液,PEG溶液(MV=400),1640液(含10%灭活小牛血清和不含血清的两种),%生理盐水,%次甲基蓝染(3).仪器设备:显微镜(800r/min),离心机,水浴箱,酒精灯,吸管,载玻片、盖玻片,滤纸。混合液离心(800r/min离心)8mlhanks液混匀实验步骤8min静置1min后37℃水浴PEG溶液热的1640液混匀37℃水浴保温悬浮离心洗涤流尽剩余液体鸡血10%悬液融化冷却至50℃%次甲基蓝染染液染色镜检37℃水浴5min离心弃上清10min吸纸吸干37℃%PEG一定要保温在37℃水浴中,不然冷却后会有结晶析出。,一定要将离心管倒置在滤纸上,流尽液体,否则残留液会改变PEG的浓度。:分别于温育5min、10min、20min、30min取细胞悬液一滴制成临时装片。两个细胞核发生,形成一个含有两个或多个核的圆形细胞。预期结果融合