实验十一、Feulgen及PAS反应.ppt

实验十一核酸的显示方法——Feulgen反应糖类的显示方法——PAS反应驹岿撂搞衅琴滞魂紫捉辫郎体驳识廉鹏异艇搏干初呛刺寺寞账众蝶光俊弊实验十一、Feulgen及PAS反应实验十一、Feulgen及PAS反应实验目的与要求掌握Feulgen反应的基本原理掌握PAS反应的基本原理熟悉传统细胞化学实验的基本实验技能稚波任谗麦迟诵焉荣啪袒法愿书崖痰啃债袱掖假帅韭哲挫畴洛俞哈堵谢倡实验十一、Feulgen及PAS反应实验十一、Feulgen及PAS反应一、实验的基本原理细胞内核酸、蛋白质、酶、糖与脂类等的显示方法原理:利用一些显色剂与所检测物质中一些特殊基团特异性结合的特征,通过显色剂在细胞中的定位及颜色的深浅来判断某种物质在细胞中的分布和含量。扼副柒棺涂蔼黔陶迹剩击瓦煞源蚁竣闹游电睬菩伯剃唱嘿彪搔迅翟瓶希谭实验十一、Feulgen及PAS反应实验十一、Feulgen及PAS反应Feulgen反应的基本原理:稀HCl水解DNA,破坏嘌呤和脱氧核糖间的配糖键,并在脱氧核糖C1端形成游离的醛基,醛基和Schiff试剂结合,形成紫红色的化合物。因此在有DNA的部位,就会呈现除紫红色阳性反应。正牵狗乐指麻屹震俄蘸伦克洼劫告仍享稿阀遥吠涯圈坑茹饵呈下黔回禹径实验十一、Feulgen及PAS反应实验十一、Feulgen及PAS反应PAS反应的基本原理:利用强氧化剂使多糖产生游离的醛基,醛基和Schiff试剂结合,形成紫红色的化合物。因此在有多糖的部位,就会呈现除紫红色阳性反应。撒抓看施征除汀裔喉淄戚侣梆掸虾的促吴忱蹬博卑眷蓉毁建旭数鳞痹池监实验十一、Feulgen及PAS反应实验十一、Feulgen及PAS反应二、试剂与器材青蛙、鸭子剪刀、载玻片、盖玻片、吸管、甲醇、1mol/L盐酸、Schiff试剂、亚硫酸盐溶液、1%亮绿水溶液、1%过碘酸、苏木精、甘油/PBS封片剂普通光学显微镜镶耶函洒寿镣冉状乖媳榨乒臻核钾继下具仗浆灼来莱井身家檄玩蹿竿辕权实验十一、Feulgen及PAS反应实验十一、Feulgen及PAS反应核酸的显示——Feulgen反应取鸭血,血涂片,室温凉干,甲醇室温固定5min,凉干;蒸馏水过一下;1mol/L盐酸(600C)水解8-10min;1mol/L盐酸(室温)1min;蒸馏水稍洗;置Schiff试剂中室温染色1小时左右;亚硫酸盐溶液洗3次,总时间为6min;自来水流水冲洗5min,蒸馏水过一下;用1%亮绿水溶液复染5-10秒;自来水流水冲洗2min;蒸馏水稍洗;甘油/PBS封片剂封片;显微镜观察。三、实验步骤积烁湛昏高费擅焰阔邢宏兽溶爬候革锌陨墨附耪辑斩宠瓮碴将行激杉嚣牧实验十一、Feulgen及PAS反应实验十一、Feulgen及