高效溶栓菌株的筛选鉴定及发酵条件优化.pdf

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高效溶栓菌株的筛选鉴定及发酵条件优化牧嫌敕椒丽,郝友进,何正波,和七一,陈治霖,陈纳豆芽孢杆菌口“按我舭托是从日本传统大豆发酵食品纳豆中分离得到的一种产蛋白酶益生菌Ⅲ属好氧型革兰氏阳性菌D啥寡挎吒司殖纳豆菌,除了具有抗菌、调节肠道微生态平衡、提高免疫力等益生功能外,在增殖过程中还产生的大量蛋白酶,能够提高蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶等酶活性,使发酵产品中富含氨基酸、有机酸、寡聚糖等多种易被人体吸收的成分,且使发酵产品具有多种保健功能,如抗肿瘤、降血压等作用,还可预防骨质疏松、抗氧化等∞“纳豆菌产生的这种蛋白酶最早由须见洋行博士发现,并命名为纳豆激酶,为纳豆菌发酵的胞外产物,是一种可溶解交联纤维蛋白的碱性丝氨酸蛋白酶口D啥辜酶除有效溶解血栓外,还可降低血液粘度、抑制血小板凝固、降血脂、降胆固醇、改善血液循环状况、维持血细胞的正常形态和功能等。作为新一代的抗血栓物质,具有较大的开发潜能。又因为纳豆激酶来源于食品,无毒副作用,而且价廉易得,为此开发溶栓保健食品具有实用价值。1狙芯坎捎美业鞍灼桨宸ù幽啥埂市售纳豆菌以及昆虫与分子生物学研究所保存的株纳豆菌株中初筛,再通过纤维蛋白平板法复筛得到昃哂懈呷芩ɑ钚缘木辏⒍运芩傅姆酵条件进行优化,以确定该菌株产溶栓酶的最佳发酵条件,为今后开发溶栓保健食品提供理论依据。材料本研究用以分离溶栓菌的样品包括:将门纳豆连将门食品有限公司⒀嗑┠啥北京燕京中发生物技术有限公司⒏叽慷饶啥咕北京纳康保健销售中心酆堂滥啥咕北京源生素源生物科技有限公司⑻旖虬俚掠郎哪啥咕天津百德生物工程有限公司⒑DΧ啥咕海摩尔本生物食品有限公司⒊N履啥咕江苏创业园实验室⒋ㄐ隳啥咕江苏纳克生物工程有限公司⒌谌阃啥咕北京纳克生物工程有限公司⒁仔心啥咕珠海市御品堂生物科技有限公司⒗コ嬗敕肿由镅а芯克4娴株具有溶栓作用的菌株。尿激酶标准品—/支河谥泄┢飞镏破芳於ㄋ纤维蛋白原/支河赟公司;凝血酶,购于荆幌妇蜃崛∈约梁校河谔旄萍北京邢薰司;其他有关试剂均为国产分析纯。.咝芩ň甑姆掷胗氤跎称取蚴柿。无菌生理盐水的试管中,于℃、痬摇床培养S靡埔浩魑。的菌悬液到的离心管中,痬离心王斌￡T诖嘶∩希源烁咝芩ň甑液体培养条件进行了单因素初步实验,方差分析后设计正交试验瑂⑴嘌寤的三角瓶装。%大豆蛋白方法样品放人年第卷第重庆师范大学学报匀豢蒲О厍焓Ψ洞笱Щ钚晕镏噬锛际踅逃抗こ萄芯恐行闹厍旄咝I锘钚晕镏使こ萄芯恐行睦コ嬗敕肿由镅а芯克厍摘要:采用酪蛋白平板法,从纳豆激酶胶囊、纳豆及多种发酵食品中筛选出了瓴芩妇辏蝗缓罄孟宋鞍灼板法比较发酵后溶栓酶活力,并从初筛菌株中筛选出耆芩富畲/的高产菌株灰谰菥中翁生理生化特征以及基因序列分析,鉴定为枯草芽孢杆菌鄐,通过软件分析确定该菌最佳发酵条件为初始值畂、温度。萘课胨;优化后的相对酶活力达/。研究结果为进一步开发纳豆等保健食品提供理论基础。关键词:溶栓菌;菌种筛选;枯草芽孢杆菌;发酵条件;纳豆激酶中图分类号:;文献标志码:文章编号:—一一作者简介:王丽,女,硕士研究生,研究方向为生物化学分子生物学;通讯作者:陈斌,网络出版地址:://甤,收稿日期:——修回日期:一—网络出版时间:一—资助项目:重庆市科技攻关重点项目瓹⒐鉟;重庆市自然科学基金重点项目瓹:.....:一甴
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峁敕治倒掉上清,再用。的无菌生理