家兔自体骨髓单个核细胞移植治疗下肢缺血研究.pdf

河北医科大学
硕士学位论文
家兔自体骨髓单个核细胞移植治疗下肢缺血的研究
姓名:张文军
申请学位级别:硕士
专业:内科学
指导教师:刘阁玲
20070301
家兔自体骨髓单个核细胞移植治疗下肢缺血的研究摘要目的:糖尿病足、动脉硬化闭塞症及血栓闭塞性脉管炎等下肢缺血性疾病是临床上常见的致残性疾病,近年来发展的于细胞技术为治疗下肢缺血的研究开辟了新的道路。为证实骨髓单个核细胞移植治疗下肢缺血的可行性,建立家兔的右下肢缺血模型并通过对家兔自体骨髓干细胞的采集、分离及制备骨髓单个核细胞悬液,将其移植到家兔缺血的右下肢中,通过移植前后的数字减影血管造影、免疫组织化学观察新生毛细血管密度、及应用兔、、一约梁胁量血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子暮浚教肿蕴骞撬璧ジ龊讼赴浦仓疗下肢缺血的机理及其与细胞因子的关系,评价自体骨髓单个核细胞移植治疗下肢缺血性疾病的安全性、可行性。方法:∮月龄日本大耳白兔只,体重—甇,随机分为四组:①对照组,未做任何干预。②缺血组,将其制成右下肢缺血模型,未做其他干预。③组姿嵫位撼逡鹤,将其制成右下肢缺血模型,用注射器将甇/撼逡悍阕⑸渥佑蚁轮ü赡收肌群内。④治疗组,将其制备右下肢缺血模型芎螅⑸淦鹘∑渥篦墓枪撬柚票傅痬墓撬璧ジ核细胞悬液分点注射于右下肢股内收肌群内。鹾笕天,切取右下肢内收肌组织标本,测量其组织匀浆中的血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、中文摘要、
成明显,与已有的毛细血管相互连接形成毛细血管网。免疫结论:自体骨髓单个核细胞移植是~种简便、有效的治暮浚核闹芎笮惺旨跤把9茉煊笆,术后取右下肢内收肌标本,免疫组化检测毛细血管密度。ú捎胻检结果:术后欤琕獴的测量结果,缺血组、椤⒅瘟谱閎乃椒直鹗高于对照组的.±/.⑷.±/,±痬,而的水平在各组中没有明显的差异。动脉造影显示对照组右下肢血流通过股动脉通畅,缺血组和檠A魇茏栌诠啥鼋嵩Γ栽睹秆9苌不明显,治疗组血流受阻于股动脉结扎处,以远毛细血管生组织化学毛细血管染色在高倍镜下观察,对照组标本毛细血管密度秆9苁弑毒平均为个,缺血组和槊秆9苊芏绕骄个,∪獗瓯久秆9苊芏让飨愿于缺血组和椋钜煊邢灾,。关键词:骨髓干细胞:自体;移植:下肢缺血验。痬±/,和.±/明显中文摘要一
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家兔自体骨髓单个核细胞移植治疗下肢缺血的研究前言缺血性下肢血管病是一组严重危害人类健康,降低患者生活质量的疾病,静息痛,皮肤溃疡、坏疽是典型的临床表并且以高发生率、高致残率和高死亡率严重的影响着人们的生活质量。随着人民生后水平的不断提高,饮食结构的改变,动脉粥样硬化所致的肢体缺血有明显增加的趋势。在治疗上可以通过血管重建或介入的方法进行治疗来达到恢复缺血肢体血流灌注的目的。但是当肢体的动脉流出道差,无法进行下肢动脉搭桥的患者,或者体质差无法耐受搭桥手术的患而无法进行上述治疗时,患者多面临截肢。近年来,干细胞移植血管再生技术为患者治疗严重下肢缺血性疾病提供了一种新途径。干细胞是各种成熟细胞的起源细胞,具有自我复制和多向分化潜能,可以向三个胚层的多种组织分化,一定条件下可以诱导分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、成肌细胞和血管内皮细胞等不同的功能细胞。骨髓来源的干细胞包括骨髓造血干细胞,和骨髓间充质干细胞琈,现代干细胞技术研究表明显て谟懈叩目伤苄裕梢苑只晌3造血组织外其他类型的组织细胞。在一定条件下能够分化为多种造血外组织特别是中胚层和神经外胚层发育来源的组织细胞,如成骨细胞、成软骨细胞、脂肪细胞、心肌细胞和神经细胞及神经胶质细胞等。干细胞移植治疗下肢缺血现。研究论丈
出了な盗顺錾笱9苄纬傻拇嬖凇闕提时多采用含有牡ジ龊讼赴幸浦病T谛律9苄纬骨髓单个核细胞演变而来,此外骨髓单个核细胞还可演变成造血干细胞。戎な翟谔逋饫丛从诘ジ龊讼赴赴芊只纬裳9苣谄は赴谔迥谀鼙挥盏夹纬的主要目标是促进下肢血管新生。血管新生有两种不同的形式:一种是血管生成,在既存成熟血管床基础上芽式生长成毛细血管。另一种是内皮祖细胞苑茄渴缴ぃ过血管壁向内凹陷,贯穿毛细血管支柱导致血管腔裂开而形成血管网,称为血管发生。对于下肢缺血性疾病,目前多采取血管发生形式,且人们将注意力集中到了对难芯可稀侵改芊只Q9苣谄は赴那疤逑赴ù友R貉管母细胞到成熟内皮细胞之间的多个阶段的过渡细胞。它是机体生成新生血管的基础。年谘Q分蟹掷出了治疗性血管生成的概念,通过