短尾蝮蛇毒纤溶酶原激活剂的抗栓作用的分析研究.pdf

短尾蝮蛇毒纤溶酶原激活剂的抗栓作用研究英文缩写 MCA A ACA PcomA rt-PA DSA PAGE middle cerebral artery internal cator d mon cator d artery anterior cerebral artery municating artery 大脑中动脉颈内动脉颈总动脉大脑前动脉后交通动脉 binant tissue plasminogen重组组织型纤溶酶原激活 activator 剂 Digital substract angigrpahy 数字减影血管造影 Polyacrylamide gel electrophoresis聚丙烯酰胺凝胶电泳 GBV— Activator from Gloydius短尾蝮蛇纤溶酶原激活剂 UK ACN TFA brevicaudus Venom urokinase acetoni trile trifluoroacetic acid 尿激酶乙腈三氟乙酸学位论文原创性声明和版权使用授权书学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的真实成果。除文中已注明引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本论文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。作者签名(手写):盆型加口g年易月Z日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权福建医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书) 作者签名(手写):会施铹导短尾蝮蛇毒纤溶酶原激活剂的抗栓作用研究摘要蛇毒是由多种生物活性多肽和蛋白质组成的混合物,由于蛇毒蛋白酶可从凝血、纤溶及血小板聚集等多环节影响血液系统功能n1,因此从蛇毒中研发治疗血栓性疾病的药物,成为国内外研究的热点之一。 1993年,张云首次从竹叶青蛇毒中分离纯化出蛇毒纤溶酶原激活剂(TSV-PA), 为从蛇毒中开发新型抗栓药物提供新的课题,本课题旨在从江浙产短尾蝮(Gloydius brevicaudus)蛇毒中分离纯化出纤溶酶原激活剂(plasminogen activator from Gloydius brevicaudus venom,GBV—PA),并观察其对动物实验性血栓预防和治疗作用。 (Benzamidine Sepharose 6B)亲和层析去除短尾蝮蛇毒中大部分的非目的蛋白,目的组分再经Lichrospher C18 , 在Waters600E高效液相色谱仪上进行纯化,获得具有间接溶解纤维蛋白作用的第1I 峰,且PGBV-PA。GBV-,在p巯基乙醇还原和非还原条件下,均显示单一条带,提示其为单一肽链的蛋白质,分子量约为34kDa。 -PA对FeCI。诱导的大鼠颈总动脉血栓的溶栓作用以FeCl。诱导大鼠颈总动脉血栓形成,以大鼠舌根温度的变化判定血栓的形成和溶解情况。结果大鼠静脉注射GBV—PAl50和300“g·kg~,可以明显提高为FeCl。所降低的大鼠舌根温度,该作用持续420min以上;UK2000IU·kg。1静注也能明显提高大鼠舌根温度,但180min后作用开始减弱。比较各组大鼠颈总动脉血栓重量,GBV—PAl50 和300“g·±+,± ,与生理盐水对照组(±)相比均有显著性差异(p<),说明 GBV—PA对大鼠颈总动脉血栓具有治疗作用,且作用持续时间比尿激酶更长。 —PA对FeCl。诱导的大鼠颈总动脉混合性血栓的抑制作用大鼠颈总动脉血栓模型的制备方法同前,预先静脉注射GBV—PAl50和 300肛g·kg~,大鼠舌根温度下降值明显小于阴性对照组(p<)。GBV—PA还能明 4 短尾蝮蛇毒纤溶酶原激活剂的抗栓作用研究显减轻血栓重量,GBV—PAl50和300tLg·± ±,--+,与生理盐水对照组(-+)比较均有显著差别(p<)。说明GBV-PA可抑制FeCl。诱导的大鼠颈总动脉血栓的形成。