溶液配制.doc

1mol/L 亚精胺( Spermidine ) :溶解 亚精胺于足量的水中,使终体积为 10ml 。分装成小份贮存于-20 ℃。 1mol/L 精胺( Spermine ):溶解 精胺于足量的水中,使终体积为 10ml 。分装成小份贮存于-20 ℃。 10mol/L 乙酸胺( ammonium acetate ):将 乙酸胺溶解于水中,加水定容至 1L后,用 孔径的滤膜过滤除菌。 10mg/ml 牛血清蛋白(BSA ):加 100mg 的牛血清蛋白(组分 V或分子生物学试剂级,无 DNA 酶)于 水中(为减少变性, 须将蛋白加入水中,而不是将水加入蛋白),盖好盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到 10ml ,然后分装成小份贮存于-20 ℃。 1mol/L 二硫苏糖醇( DTT ):在二硫苏糖醇 5g 的原装瓶中加 水,分成小份贮存于-20 ℃。或转移 100mg 的二硫苏糖醇至微量离心管,加 的水配制成 1mol/L 二硫苏糖醇溶液。 8mol/L 乙酸钾( potassium acetate ):溶解 乙酸钾于足量的水中,加水定容到 100ml 。 1mol/L 氯化钾( KCl ):溶解 氯化钾于足量的水中,加水定容到 100ml 。 3mol/L 乙酸钠( sodium acetate ):溶解 的三水乙酸钠于约 90ml 水中, 用冰乙酸调溶液的 pH 至 ,再加水定容到 100ml 。 EDTA: 配制等摩尔的 Na2EDTA 和 NaOH 溶液( ),混合后形成 EDTA 的三钠盐。或称取 的 Na2EDTA · 2H2O 和 20g 的 NaOH ,并溶于水中,定容至 1L。 1mol/L HEPES :将 溶于约 90ml 的水中,用 NaOH 调 pH ( - ), 然后用水定容至 100ml 。 1mol/L HCl :加 的浓盐酸至 的水中。 25mg/ml IPGT :溶解 250mg 的 IPGT (异丙基硫代-β-D- 半乳糖苷)于 10ml 水中,分成小份贮存于-20 ℃。 1mol/LMgCl2: 溶解 MgCl2 · 6H2O 于足量的水中,定容到 100ml 。 100mmol/L PMSF :溶解 174mg 的 PMSF (苯甲基磺酰氟)于足量的异丙醇中, 定容到 10ml 。分成小份并用铝箔将装液管包裹或贮存于-20 ℃。 20mg/ml 蛋白酶 K( proteinase K):将 200mg 的蛋白酶 L加入到 水中, 轻轻摇动,直至蛋白酶 K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到 10ml ,然后分装成小份贮存于-20 ℃。 10mg/mlRnase (无 DNase )( DNase - free RNase ):溶解 10mg 的胰蛋白 RN A 酶于 1m l的 10mmol/ L的乙酸钠水溶液中( pH )。溶解后于水浴中煮沸 15min , 使 DNA 酶失活。用 1mol/L 的 Tris - HCl 调 pH 至 ,于-20 ℃贮存。(配制过程中要戴手套) 5mol/L 氯化钠( NaCl ):溶解 氯化钠于足量的水中,定容至 100ml 。 10N 氢氧化钠( NaOH ):溶解 400g 氢氧化钠颗粒于约 水的烧杯中(磁力搅拌器搅拌),氢氧化钠完全溶解后用水定容至 1L。 10 % SDS (十二烷基硫酸钠):称取 100gSDS 慢慢转移到约含 的水的烧杯中,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用水定容至 1L。 2mol/L 山梨(糖)醇( Sorbitol ):溶解 山梨(糖)醇于足量水中使终体积为 100ml 。 100 %三氯乙酸( TCA ):在装有 500gTCA 的试剂瓶中加入 100ml 水,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。(稀释液应在临用前配制) % X- gal ( 5-溴-4- 氯-3- 吲哚- β-半乳糖苷):溶解 25mg 的 X- gal 于 1m l 的二甲基甲酰胺( DMF ) ,用铝箔包裹装液管,贮存于-20 ℃。 100 × Denhardt 试剂( Denhardt's regent ) 成分及终浓度配制 100ml 溶液各成分的用量 2% 聚蔗糖( Ficoll , 400 型) 2% 聚乙烯吡咯烷酮( PVP-40 ) 2%BSA (组分 V) 水