《动物细胞培养》实验内容.doc

1 《细胞工程实验技术》(动物细胞培养部分) 目录实验一实验器材的清洗、包装和消毒.................................................................... 1 实验二常用的仪器设备介绍.................................................................................... 2 实验三常用动物细胞培养用液的配制.................................................................... 2 实验四组织块原代培养、传代培养及生物学检测............................................... 4 实验五心肌细胞的原代培养、传代培养及培养细胞的常规检查....................... 6 2 实验一实验器材的清洗、包装和消毒一、实验目的 1、掌握细胞培养常用实验器材的清洗要领、清洗步骤和注意事项。 2、掌握细胞培养常用器材的包装要领和要求。 3、掌握正压滤器的安装、使用和拆除方法及操作注意事项。二、实验用品以组为单位包装物品 1、量筒( 100mL 、 500mL ) 2、大、小烧杯 3个 3、 1000mL 容量瓶×14、移液管 1mL × 3( 灭菌)5、( 100mL 、 250mL 、 500mL )盐水瓶、( 500mL )广口瓶×各 4( 灭菌) 6、眼科剪刀、眼科镊子各 2把( 灭菌) 7、细胞培养瓶× 3( 灭菌) 其它:饭盒、青霉素瓶、牛皮纸、离心管、滴管、注射器、磁棒、绳、标签纸等杂干。三、实验内容(一) 清洗 1、要领:浸泡、刷洗、酸泡。 2、步骤:洗衣粉浸泡 12h →刷洗→流水震荡冲洗 15~20 遍→漓水→蒸馏水洗荡 2次→ 37℃烘干→待包装。 3、注意事项: (1) 使用后的器材要立即投入水中。(2) 器皿内要充满液体,不得有气泡。(3) 器材要用流水震荡干净。(二) 包装 1、大的器材如:量筒、广口瓶、培养皿、吸管等要包装。 2、小的器材如:注射器、剪刀、镊子放入饭盒。 3、注意事项: (1) 包装时手指与器材接触面积要小,手指不能触及器材使用端。(2) 封闭器材使用端,标记器材手持端。(3) 小包装(4) 玻璃管道口加棉花。(三) 湿热消毒:高压灭菌锅消毒四、作业 1、清洗的要求为何较高?你认为该如何保证器皿中无杂质? 2、器材包装有何要求? 3、3 实验二常用的仪器设备介绍一、实验目的了解动物细胞培养中常用仪器设备的使用方法、注意事项和保养方法二、实验用品 1) 超净工作台 2) 自动双重纯水蒸馏器 3) 高压蒸气灭菌器 4) 过滤器 5) 电热恒温干燥箱 6) 二氧化碳培养箱 7) 冰箱 8) 倒置显微镜三、实验内容 1、了解超净工作台的工作原理 2、自动双重纯水蒸馏器结构、使用注意事项。 3、高压蒸气灭菌器的工作原理 4、正压过滤器的使用方法 5、二氧化碳培养箱的使用方法四、作业 1 、叙述超净工作台的工作原理 2 、正压过滤器为何会除菌 4 实验三常用动物细胞培养用液的配制一、实验目的掌握常用动物细胞培养用液的组成及配制方法。二、实验用品与仪器量筒、烧杯、广口瓶、