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91型法医鉴定及亲子鉴定试剂盒产品说明书.docx


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前 言
本试剂盒采用多色荧光标记、多重PCR复合扩增方法对人基因组DNA中STR位点的多态性进展检测,通过分析扩增结果来确定血样、精斑、牙齿、骨骼、毛发、唾液等生物检材的基因型。AGCU 10+1 STR荧光检测试剂盒可以进展11个DN前 言
本试剂盒采用多色荧光标记、多重PCR复合扩增方法对人基因组DNA中STR位点的多态性进展检测,通过分析扩增结果来确定血样、精斑、牙齿、骨骼、毛发、唾液等生物检材的基因型。AGCU 10+1 STR荧光检测试剂盒可以进展11个DNA位点〔10个STR位点和1个性别位点〕的同步扩增并利用四色荧光技术进展检测。本试剂盒包含的DNA位点有Amelogenin 、D3S1358、D13S317、D7S820、D16S539、D8S1179、D21S11、D18S51、vWA、D5S818、FGA。
试剂盒规格
本试剂盒可供200次样品实验。
试剂盒组成
扩增前试剂盒
Reaction Mix
1000μl ×2支
含PCR缓冲液、MgCl2和dNTPs
Primers 10+1
1000μl ×1支
含11个位点的11对引物
热启动酶
100μl ×1支
5 U/μl
Control DNA 9947A
200μl ×1支
9947A基因组DNA
sdH2O
1500μl×1支
超纯水
扩增后试剂盒
10+1Allelic Ladder
50μl ×1支
含11个位点的等位基因〔见附表〕
AGCU Marker
ROX-450
250μl ×1支
荧光分子量内标
实验所需主要仪器设备
PCR扩增仪、ABI遗传分析仪〔310、3100、3130等〕、高速离心机、洁净工作台、微量移液器、冰箱、紫外分光光度计、电炉或恒温水浴锅。
试剂盒使用方法
(试剂使用前请轻微振荡,并短暂离心)
1. DNA提取及定量
待检样品先用磁珠法或Chelex-100法提取基因组DNA,~ ng/μl。
2. PCR反响
按如下过程实验:
PCR反响体系
基因组DNA模板 10μl〔含基因组DNA约2ng〕
Primers 10+1 5μl
Reaction Mix 10μl
热启动酶
总体积 25μl
每次实验都要求同时做阴性对照和阳性对照
PCR循环参数
初始变性
热循环
终延伸
保 温
9 95℃11分钟
10个循环:94℃ 1分钟,
62℃ 1分钟,72℃ 1分钟
20个循环:94℃ 1分钟,
60℃ 1分钟,72℃ 1分钟
60℃,45分钟
4℃维持
3. 电泳检测
取2μl PCR产物或10+1 Allelic AGCU Marker ROX-450和15μl去离子甲酰胺混合,95℃变性5分钟后立即冷却用于电泳检测。
〔Matrix标准品由FAM、HEX、TAMRA、ROX组成,位点基因分型数据软件由我公司

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