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一种利用比色法测定葡萄糖浓度的方法
一种利用比色法测定葡萄糖浓度的方法
本发明公开一种利用比色法测定葡萄糖浓度的方法，其包括以下步骤：采用葡萄糖氧化酶催化样品中的葡萄糖，使之释放出过氧化氢；同时向样品中添加辣根过氧化物酶与金纳米棒，辣根纳米棒的在制备过程中可能会用到含有卤元素的表面活性剂。通常而言，在使用金纳米棒前，会采用离心法对金纳米棒进行纯化，以除去上述含有卤元素的表面活性剂。但设计人在设计本发明技术方案中意外地发现，若金纳米棒上仍有卤化物残存时，上述的蚀刻反应更加容易进行。为排除其他影响因子。设计人还对纯化后的金纳米棒另外加入卤化物，与未加卤化物的对照组相比，最终验证得在卤化物对蚀刻反应的促进效果。
[0010]更进一步的，所述卤化物可选自十六烷基三甲基溴化铵或碘化钠或溴化钠或溴化铵的任一种。
[0011]本发明还提供一种葡萄糖检测反应体系，其组分包含:葡萄糖氧化酶、辣根过氧化物酶、金纳米棒、卤化物与硅胶。
[0012]由于辣根过氧化物酶与其他生物酶有较好的相容性，可以将葡萄糖氧化酶与之络合，以提高检测的效率。采用本发明提供的葡萄糖检测反应体系进行检测时，只需将待测样品滴加到上述的体系中，便可直接通过肉眼采用比色法完成对样品中葡萄糖浓度的确定，这一操作简便、快捷，无需经过专业的训练，特别有利于本技术的大规模推广。
[0013]进一步的，所述葡萄糖检测反应体系中葡萄糖氧化酶的浓度为30— 60nM，—2 μ Μ，卤化物浓度为Ι-lOmM，—
,以及余量的硅胶。
[0014]更进一步的，所述葡萄糖检测反应体系中还包含有20mM的柠檬酸盐缓冲液； — 。
[0015]—，具有较高的反应活性。超出此范围，有可能导致两种酶的失活。柠檬酸盐缓冲液则能够使体系的PH处于较为稳定的状态。
[0016]本发明还提供一种上述葡萄糖检测反应体系的制备方法，包括以下工序:；；、金纳米棒、辣根过氧化物酶、卤化物及柠檬酸盐缓冲液；。[0017]进一步的，葡萄糖检测反应体系的制备方法， - M十六烷基三甲基溴化铵3-，加入生长溶液所制成的；-、-、-、--20mL。
[0018]进一步的，还需除去金纳米棒中的卤素，具体为将制得的金纳米棒以7000rpm下离心处理20分钟，弃去上清液。
[0019]除去金纳米棒上残存的卤素，有利于实现对体系中卤化物浓度的精确控制。
[0020]更进一步的，制备硅酸盐前体是指按重量份计，将1-5份的硅酸钠与10 — 20份的去离子水混合成硅酸钠溶液，然后向其加入按重量份计3— 8份的阳离子交换