高效液相色谱简介.ppt

高效液相色谱简介
第1页，共16页，2022年，5月20日，20点35分，星期四
论文内容
色谱分析方法发展概述
分类
基本原理
流出曲线及有关术语
高效液相色谱简介
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论文内容
色谱分析方法发展概述
分类
基本原理
流出曲线及有关术语
高效液相色谱简介
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1903年 Tswett创立色谱法（在碳酸钙上分离了叶绿素）
20世纪四五十年代 出现了纸色谱（PC)和薄层色谱法（TLC)
1952年 James和Martin提出了气相色谱法（GC)
20世纪60年代后期 液相色谱法得到了快速发展 论文内容
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分配系数 K和分配比k
K=(溶质在固定相中的浓度)/(溶质在流动相中的浓度)
=Cs / Cm
K为每一溶质的特征值，仅为固定相和温度有关，与两相体积论文内容、柱管特性及仪器无关。
k=(组分在固定相中的质量)/(组分在流动相中的质量)
=Ms / Mm
两峰间的距离由组分在两相间的分配系数决定；峰宽由组分在色谱柱中传质和扩散行为决定。
两个理论（塔板理论和 速率理论）
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色谱流出曲线示意图
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有关术语
1）色谱流出曲线和色谱峰
2）基线
3）峰高
4）保留值（死时间、保留时间、调整保留时 间、死体积、保留体积、调整保留体积、相对保留值）
5）区域宽度（标准偏差σ,半峰宽W1/2，峰底宽度W）
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样品所含组分的最少个数；
定性分析（保留值）；
定量分析（峰高或面积）；
分离效能（保留值及区域宽度）；
两相选择的依据（峰间距离）
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从色谱流出曲线中可以得出许多重要信息：
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高效液相色谱(HPLC)流程示意图
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HPLC组成图
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HPLC组成示例
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高效液相色谱法的特点
高压：一般可以达到150~300kg/cm2
高速：一般可以达到1~10mL/min
高效：一般可以达到60000理论塔板/米
高灵敏度 ：微升数量级的就可以进行全分析
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分类：液—液分配色谱
液—固分配色谱
离子交换色谱
排斥色谱
选择：样品的分子量范围
溶解度
分子结构
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高效液相色谱的应用
高效液相色谱，特别适用于分离
沸点高和热稳定性差的物质，目前已
广泛应用于化工、食品、医药、生化、
卫生、环境保护和高能化合物等生产
和科研工作中。
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