氯化两面针碱的体外肾毒性研究.docx

氯化两面针碱的体外肾毒性研究【摘要】目的观察氯化两面针碱在体外对人胚肾细胞293的毒性作用。方法采用MTT法检测不同浓度氯化两面针碱对人胚肾细胞293的毒性。结果氯化两面针碱在体外对人胚肾细胞293有一定的毒性作用。结论氯化两面针碱可抑制人胚肾细胞293的增殖,对肾脏有一定的毒性。【关键词】氯化两面针碱;人胚肾细胞293;体外肾毒性Abstract:ObjectiveTodetectthetoxicityofnitidinechlorideinhumankidneycell9inproliferationwasassayedbyMTTchlorideinhibitedtheproliferationofhumancell9inadose-:Nitidinechloride;Humankidneycell93;Kidneytoxicity;Invitro中药抗肿瘤是目前医学界研究的一个热点,很多中药成分被证实具有较好的抗肿瘤效果而得以逐步走向临床。氯化两面针碱是两面针制剂的主要有效成分,在抗炎、镇痛、抗肿瘤、心血管系统等方面的作用已有较多报道。氯化两面针碱有较强的抗癌作用,据文献[1]报道,氯化两面针碱对LEWIS肺癌、鼻咽癌、肝癌、慢性粒细胞白血病均有抑制作用,对小鼠艾氏水癌、肝癌腹水也有效,而其对肾的毒性问题未见报道,特别是在细胞水平、分子水平都未见报道。作为一个新型的抗肿瘤药物,其肾毒性大小至关重要。本实验中,我们考察了氯化两面针碱在体外对人胚肾细胞293的毒性作用。 1材料与仪器试药氯化两面针碱标准品(中国药品生物制品检定所);四噻唑蓝(MTT)(Sigma公司);二甲基亚砜(DMSO)(Sigma公司);DMEM(美国GIBCOBRL公司);胎生牛血清(杭州四季青生物材料研究所公司);胰蛋白酶(美国Amresco公司公司);谷氨酰胺(美国Amresco公司);PBS(美国Amresco公司);注射用青霉素钠(华北制药股份有限公司);注射用硫酸链霉素(大连美罗大药厂);HEPES(Sigma公司)。(美国FormaScientific公司);倒置显微镜(日本Olympus公司);酶标仪(芬兰thermo公司);超低温冰箱(日本三洋公司);96孔培养板(美国BIO-RAD公司);6孔培养板(美国BIO-RAD公司);超净工作台(苏州净化设备厂);台式离心机(上海安亭科学仪器厂);电热恒温水浴锅(北京市医疗设备厂)。(南京凯基生物科技发展有限公司)。,加入g,,加入青霉素、链霉素使其终浓度为100U·ml-1,在超净工作台中过虑除菌,分装成90ml/瓶,-20℃保存备用,临用前加10ml热灭活(56℃,30min)胎牛血清。.梯度氯化两面针碱的制备精密称定氯化两面针碱标准品适量用DMSO溶解后,用无血清培养液依次稀释,配置成,,,,,置于4℃冰箱中保存备用。.细胞培养人正常胚肾细胞293分别培养于含DMEM完全培养