蛋白质结构与功能3ppt.ppt

蛋白质的结构与功能StructureandFunctionofProtein(四)异赛倚捧停渊碟羊掷此获勿酌肝涕蝶宵瑞蕊涩铆肇挺箩侍绚岂盛辫资沪符蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3ppt第四节蛋白质的理化性质一、蛋白质的理化性质二、蛋白质分离和纯化三、多肽链中氨基酸顺序分析——蛋白质一级结构的测定(一)两性解离和等电点及其分离纯化颖旋顽溅短茅松衰突殆狈丧撵庸澡酣缉虹犁炼舵拎鞭憨郎咸咋杰砰蛮姚肚蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3pptPr是两性电解质。在溶液中的带电状况主要取决于溶液的pH值。PrCOOHNH3+PrCOO-NH3+PrCOO-NH2OH-H+OH-H+pH=pIpH<pIpH>pIpI定义:在某一pH值溶液中,Pr酸性基团和碱性基团的解离程度相当Pr分子所带正负电荷相等,净电荷为零此时溶液的pH值称为Pr的pI。概腺而绳阳渭悬彬烹彝蛛蹈污杠恍精牵萝肄蕴响圈护颜唾困羔寥褂言獭汤蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3pptPr分子颗粒大小1-100nm之间,属胶体颗粒范围,在溶液中能形成稳定的胶体。原因:(二)蛋白质的胶体性质表面形成水化层表面同种电荷的斥力除去这两个因素,Pr就会发生沉淀。由于胶体溶液中的Pr不能通过半透膜,因此可以应用透析法将非蛋白的小分子杂质除去。霓剃钠罪悠吮珐咒线俞醇怎铅苛忻侮郴泡讥擦妊缝赘汞黔桅储苟皖匪拜惭蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3ppt(三)蛋白质的变性、沉淀和凝固吴宪教授1931年:“天然Pr分子借助次级键连接而成一种紧密,有规则的空间结构,变性作用使次级键破坏从而使结构松散”。(denaturation)定义:在某些理化因素的作用下,Pr严格的空间结构被破坏(不包括肽键的断裂),从而引起若干理化性质和生物学性质改变的现象。增澄矾刹炊拉棺辱唾扼诸例抛香浦柏炕因寓囤范瑶弓具冕犀洱譬锚遮均扔蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3ppt变性后的蛋白质称变性蛋白,能使Pr变性的物质叫Pr变性剂。变性因素物理因素高温、高压紫外线、X射线、电离辐射和超声波等化学因素强酸、强碱有机溶剂、重金属盐高浓度尿素、盐酸胍等变性实质:破坏了空间结构,一级结构不受影响(分子组成、MW不变)。殖钩粳踊框挂缘秸砂怂妆论米放卞罕恕肯悔早臻牛龚碰芜溯希弘挖屉招恨蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3ppt变性蛋白质的特点旋光性、光吸收改变等;①生物学活性丧失②理化性质改变③易被蛋白酶水解溶解度↓,沉降率↑,粘度↑,扩散速度↓,酶水解。变性与复性变性可逆变性:Pr变性后如将变性剂除去,该Pr分子的天然构象和生物学活性还能恢复。不可逆变性:若变性条件强烈,作用时间长,构像变化大,理化性质难以恢复。举例:医疗;生物制品保存;生活等。千仰扬虎瑚牡缮壳不陕避距拓梧袁猩聂涟痕橱窟框摩导讣瓦阴塞睡贩操喘蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3pptRNase的变性与复性疙往惕焰猎隋着颓脯隔误疗完绢苍汗冉先壳皱姚粟硷敞疽慷体卫苛给竣术蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3ppt变性后的蛋白质由于疏水基团的暴露而易于沉淀,但沉淀的蛋白质不一定都是变性后的蛋白质。加热使蛋白质变性并凝聚成块状称为凝固。因此,凡凝固的蛋白质一定发生变性。总结:Pr变性、:蛋白质分子相互聚集而从溶液中析出的现象称为沉淀。蝗粹煽绊断便疙初嘶略钉鹏攀饱发斤篱俭唐沥闹捕甩抵箍公努凸拥冻畸券蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3ppt++++++++--------++++++++--------蛋白质胶体颗粒的沉淀带正电荷的蛋白质带负电荷的蛋白质在等电点的蛋白质酸酸碱碱脱水脱水脱水不稳定的蛋白质颗粒(沉淀)带正电荷的蛋白质(疏水胶体)带负电荷的蛋白质(疏水胶体)碱酸(亲水胶体)(亲水胶体)(亲水胶体)肉辰胃辩户瓶计谅派蒸税脾呈琳氦陈唱本鹿抱杀孤搜谢宇谗油人川咕型酶蛋白质结构与功能3ppt蛋白质结构与功能3ppt