目的茶叶中咖啡因的提取及hplc鉴定咖啡因.ppt

学习从茶叶中提取咖啡因的基本原理和方法，了解咖啡因的一般性质。
掌握用索氏提取器提取有机物的原理和方法。
进一步熟悉萃取、蒸馏、升华等基本操作。
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一、实验目的
茶叶中咖啡因的提取及HPLC鉴定
咖啡因（1,3,7-三甲基-2,6-二氧嘌呤）
萃取富集
升化精制
咖啡因呈弱碱性，常以盐或游离状态存在，能溶于氯仿、丙酮、乙醇和水。选择一定溶剂（如乙醇）对茶叶中咖啡因进行萃取富集。
mp. 234-237℃
升华温度：178 ℃
二、实验原理
三、实验装置
索氏提取器
蒸馏装置
四、实验步骤
8 g茶叶末
80 mL95%乙醇
150 ml圆底烧瓶
加热回流1h
改成蒸馏装置
蒸去乙醇
回收乙醇
大部分
5-10ml残液
倒入蒸发皿中
少量乙醇洗涤烧瓶
加入4-5g生石灰粉末
蒸干乙醇
蒸发皿移至石棉网
小火加热升华
有咖啡因针状晶体出现时停止加热
小火焙炒
蒸去水分
加盖滤纸片
咖啡因的鉴定
1）与生物碱试剂反应
取少量咖啡因晶体于小试管中，加1mL水，微热，使固体溶解。分装于两支试管中，一支加入1~2滴5%丹宁溶液，记录现象。另一支加入1~2滴10%HCl，再加入1~2滴碘化铋钾溶液，记录现象。
2）氧化
取少量咖啡因于表面皿中，加入30%双氧水8~10滴，置于水浴上蒸干，记录残渣的颜色。再加1滴浓氨水于残渣上，观察并记录颜色变化
医用化学实验
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HPLC鉴定
标准系列溶液的配制：
分别移取咖啡因储备液
、、、、、于10mL容量瓶中用35:65甲醇/水(体积分数)流动相定容，摇匀、备用；得到一系列标准溶液。
样品制备：移取适量体积样品，超声脱气5min，用滤膜过滤，取已滤样品于10mL容量瓶中，用35:65甲醇/水(体积分数)流动相定容至刻度，摇匀、备用。
打开电脑工作站，输入相应的分析参数，待基线稳定后，开始进样分析。
当咖啡因的色谱峰出完后，按工作站停止按钮，进行数据处理。
记录各标准溶液出峰时间，峰面积，绘制工作曲线。
根据标准品中咖啡因的出峰时间，定性判断样品中的咖啡因，并根据工作曲线确定样品中的咖啡因含量。
医用化学实验
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注意事项
1、滤纸筒的直径要略小于抽提筒的内径 ,