苦参碱诱导体外大鼠肝星状细胞凋亡机制研究.pdf

硕士研究生毕业论文福建医科大学苦参碱诱导体外大鼠肝星状细胞凋亡机制的研究所在院:第一临床医学院研究生:胡雨云学科ㄒ;外科学胀ㄍ饪师:林永垫教授翁山耕副教授研究起止期:年轮月导二六年三月分类蟹:.学校代号学号
苦参碱诱导体外大鼠肝星状细胞凋亡机制的研究中文摘要目的:,,探讨苦参碱诱导大鼠肝星状细胞凋亡的机制。方法:体外培养大鼠肝星状细胞系一,不同浓度./,,用半定量方法及免疫细胞化学方法检测琾,—癈的表达情况,分析它们表达量与凋亡率的关系。结果:,并且凋亡率在痬嗖渭钆ǘ仁弊罡:琾,及它们的蛋白表达随苦参碱的浓度加大而表达升高,,在痬蔽W畹结论:::痯通路的激活,,上调蛋白表达,可能是苦参碱诱导。凋亡的机制之一。关键词:苦参碱騊基因—基因细胞凋亡琀,.
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言前骽肝纤维化是指各种原因所致的肝脏内纤维结缔组织增生,细胞外基质,的合成大于降解导致肝内瘸粱牟±砉蹋歉斡不那捌病变,在我国乙型肝炎多发,肝纤维化发病率很高,一旦进展为肝硬化,预后较差。目前认为肝纤维化是可逆的,而肝硬化是不可逆的。因此,积极研究肝纤维化的发病机制及寻找抗肝纤维化的有效途径,阻止肝纤维化进展为肝硬化,具有十分重要的意义。目前研究认为肝纤维化形成大致可分为三个阶段:以肝细胞坏死和慢性炎症为前提;炎性介质激活肝脏枯否氏细胞琄释放大量细胞因子和活性氧为中间环节:继之患せ睿铣梢越涸V鞯腅过度沉积于肝脏。其中,的活化是肝纤维化过程中关键事件。诟蜗宋衅鸸丶饔茫歉蜗宋盓的主要来源细胞。置贮脂细胞,位于肝窦周的湎叮歉卧嗟囊恢旨渲氏赴J崩锞蚕⒆刺要参与维生素拇⒋婧痛唬⑼ü鹘诟卧郋合成与降解之间达到动态平衡,保持肝脏的正常结构。在肝受到损伤时它们会变成纤维细胞,产生胶原合成多。而且在肝脏损伤时,肝细胞及等产生并分泌血小板衍生生长因子,⒆;ひ蜃右,瓸认赴蜃樱进一步激活自身及周围的静息被罨腍收缩性增强,包绕肝窦,增加肝内血流压力,最终加快肝纤维化的进程。近来研究表明,逆转肝纤维化关键在于减少激活的俊4永砺凵辖玻跎偌活的坑辛教跬揪叮簂、逆转募せ睿肏由活化型变回静止型。⒂盏蛲觯苯蛹跎貶数量。但研究表明凋亡是减少活化型康淖钪饕M揪丁活化型勺苑⒎⑸蛲觯蛲鱿赴腅孀臜激活的加强而增加,静止型不发生凋亡。这可能是机体对抗肝纤维化一种自身保护机制。而且提示促罨殖的信号产生同时会引起凋亡信号的激活,因此,从牡蛲鋈胧郑芯咳绾斡盏己促进活化型牡蛲龀晌8蜗宋瘟频闹匾2呗浴苦参碱是从豆科槐属植物苦豆子、苦参中分离出的生物碱,临床应用于治疗慢性乙型肝炎,显示较好的效果。近年研究表明苦参碱有抗肝纤维化作用,对免疫性肝损伤动物模型的研究发现,苦参碱治疗组肝脏结构基本正常,未见胶原纤维增生,提示苦参碱具有防治肝纤维化的作用,但其作用机制尚未明确。我们研究所前期研究发现,苦参碱
能促进体外培养的牡蛲觯叶愿蜗赴坏藓Ψ炊茉谝欢ǖ呐ǘ认麓俳增殖,可能是其抗肝纤维化并且护肝的原因,但其促蛲龅幕苹共磺宄N颐在前期研究中还发现苦参碱能引起纳窬ひ蜃及泶锔谋洌撇馄淇赡苁峭ü齆/揪洞俳鳫凋亡的。芄淮俳⒂械母芯跎窬<敖桓猩窬5拇婊罴胺只Q墒斓纳窬并维持其正常的生物学功能。近年研究发现,司哂猩窬Q蜃拥囊话愎δ芡还可以诱导细胞凋亡。这一功能是通过唇榈嫉摹是牡颓缀土κ芴澹肿瘤坏死因子,受体超家族的成员。峁股嫌隑细胞抗原和乖有同源性能促进细胞凋亡。在肝脏,活化的苛冶泶飌,但是其他肝实质细胞却不表达谔逋庥锰砑覰的培养基培养活化的胞凋亡明显增加。年等发现,活化型鼙泶飌,而静止型约肝脏中的其他细胞成分都不表达篘与活化型砻鎝结合后,导致凋亡。等又发现,肝脏受损伤后肝细胞表达浔泶锪坑際的凋亡率呈正相关,而肝脏的其他细胞成分不表达闐等用免疫组织化学方法和椒ǚ⑾秩擞氪笫蟮母涡切蜗赴鼙泶飌及R陨现ぞ荼砻疦途径是一条有选择性的蛲鐾揪叮腔逶诟卧嗍芩鹗倍钥垢蜗宋种有效保护措施。利用疦途径选择性促进活化型蛲觯北苊飧卧嗟钠他细胞成分受到伤害,将成为逆转肝纤维化治疗的新策略。基因是一经典的凋亡基因,目前众多的研究表明许多细胞凋亡过程中都涉及到它的激活,常常被称为“死亡刽子手”。,它对许多细胞的增殖与凋亡起着重要的作用。从理论上讲,雙结合到牡蛲觯琧一募せ钣Ω么τ谡鐾返闹漳┙锥危鳱甂可能起着中介作用。苦参