超高效液相色谱UPLC.ppt

超高效液相色谱UPLC
2021
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2021
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超高分离度
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随着dp的降低，N值会增加；而N值增加，则Rs值增加
ACQUITY UPLCTM系统： μm颗粒提供的柱效比5 μm颗粒提高了3倍。 μm颗粒的分离度比5 μm颗粒提高了70％。
UPLCTM与HPLC：分离度比较
μm颗粒提高了分离能力，可以分离出更多的色谱峰，从而对样品提供的信息达到了一个新的水平。
超高速度
高通量实验室始终要求在单位时间内提供更多的信息和处理更多的样品并保证提供高质量的数据。
较小的颗粒能超乎寻常地提高分析速度而不降低分离度。
1
最佳流速∝ ——
dp
颗粒度减小后，柱长可以按比例缩短而保持柱效不变
颗粒度越小，最佳流速也越大，进而可以通过提高流速来进一步加快分离速度
UPLCTM与HPLC：速度比较
由于ACQUITY μm颗粒，柱长可以比用5 μm颗粒时缩短3倍而保持柱效不变，而且使分离在高3倍的流速下进行，结果使分离过程快了9倍而分离度保持不变。
UPLCTM美国药典有关物质分析实例
原有HPLC分析需要三根不同的色谱柱，至少需要65分钟才能完成；UPLCTM使用了一根色谱柱，在1分钟内即可完成。
超高灵敏度
过去提高灵敏度的工作集中在检测器上，包括光学、质谱检测器。然而采用超高效色谱系统就能获得灵敏度的显著提高。
1
峰高∝ —
Y
简单方便的方法转换
UPLCTM：最佳的质谱入口
由于色谱峰扩散不大，增加了峰浓度，有利于提高离子源的效率，因而使灵敏度至少提高了3倍。
UPLCTM的超强分离能力有助于目标化合物与与之竞争电离的杂质的分离，从而可以使质谱检测器的灵敏度因离子抑制现象的减弱或克服而得到进一步的提高。
HPLC-MS到UPLCTM-MS：灵敏度的额外提高
填料颗粒尺寸的演变
Minutes






AU



一分钟以内！
速度、灵敏度及分离度的完美结合
UPLC

仅仅有小颗粒不能构成UPLCTM
大幅提高色谱柱的性能；第一要解决小颗粒填料的耐压问题，第二要解决小颗粒填料的装填问题。
高压溶剂输送系统（超过15000psi）。
完善的系统整体性设计，降低死体积。并解决超高压下的耐压及渗漏问题。
快速自动进样器，降低进样的交叉污染。
高速检测器。
系统控制及数据管理，解决高速数据的采集、仪器的控制问题。
检测器：
光学及/或质谱检测器
可调紫外或光电二极管矩阵
为UPLC™专门优化的流动池
高速检测
色谱柱管理：
创新的枢轴转动设计
置色谱柱出口直接到检测器
样品管理器：
低扩散XYZZ’形式
快速进样周期
低交叉污染
样品盘及/或样品瓶
可选样品组织器
两元溶剂管理：
高压混合
两元梯度
四溶剂选择
在线脱气
低扩散设计
UPLC的耐压能力
超高效液相色谱的C18色谱柱
µm
色谱柱长可达3-5cm
色谱柱颗粒化学
色谱柱硬件
筛板、柱管和连接件，可在超过140MPa压力下装填，保证色谱柱高柱效和长寿命。
可记录进样次数、最大反压及温度
智能芯片自动下载关键参数到色谱柱历史文件
信息不可删除
含有该色谱柱独特的分析证书
eCord 装置
超高效液相色谱的输液系统
二元溶剂管理系统
高压混合
二元梯度
四溶剂选择
在线脱气
低扩散设计
耐高压
UPLC超高压输液泵的特性
与普通HPLC的高压梯度系统相比，UPLC的梯度性能极佳
当梯度陡度为